Question

13．我國最早的詩集《詩經(jīng)》中有“田中有廬，疆場(chǎng)有瓜是剝是菹”的詩句，其中“廬”和“瓜”是蔬菜，“剝”和“菹”是腌制加工的意思．泡菜是一種歷史悠久、深受群眾喜愛的傳統(tǒng)美食．某興趣小組的同學(xué)進(jìn)行了制作泡菜的實(shí)踐活動(dòng)．
回答下列問題：
（1）按清水與鹽質(zhì)量比為4：1的比例制好鹽水后，需將鹽水煮沸，其作用是除去鹽水中的氧氣和殺菌．
（2）為測(cè)定泡菜中亞硝酸鹽含量，首先要配制煙硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)顯色液，并與樣品進(jìn)行比較．泡菜制作的第3-5天亞硝酸鹽含量較高不宜食用，原因是適宜的pH、溫度和一定微生物作用下亞硝酸鹽轉(zhuǎn)變成致癌物質(zhì)亞硝胺．
（3）若將稀釋10⁵倍的某細(xì)菌菌液，用直接計(jì)數(shù)法和稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)．
①直接計(jì)數(shù)法：用吸管吸取0.1ml該菌液，滴于血球計(jì)數(shù)板上的蓋玻片邊緣，待該細(xì)菌全部沉降到計(jì)數(shù)室底部，用顯微鏡直接計(jì)數(shù)，并計(jì)算出每升菌液的細(xì)菌數(shù)目．
②稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)：在五個(gè)固體培養(yǎng)基上分別接種0.1ml該細(xì)菌菌液，適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，培養(yǎng)基上的菌落數(shù)分別為：20、40、152、154、156，則每升菌液中細(xì)菌數(shù)量為1.255×10¹¹個(gè)．
③正常操作情況下，上述兩種計(jì)數(shù)法中，直接計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)獲得的細(xì)菌數(shù)量數(shù)目偏多，原因是直接計(jì)數(shù)法無論菌體死活均被計(jì)數(shù)，而稀釋涂布平板法當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落．

Answer 1

分析 1、測(cè)定亞硝酸鹽含量的原理：在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N1萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料．將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行目測(cè)對(duì)比，可以大致估算出亞硝酸鹽的含量．
2、統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法
（1）顯微鏡直接計(jì)數(shù)法
 ①原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物數(shù)量；②方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)； ③缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌．
（2）間接計(jì)數(shù)法（活菌計(jì)數(shù)法）
 ①原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌．通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌．
②操作
a、設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性．
b、為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)．
③計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)．

解答 解：（1）按清水與鹽質(zhì)量比為4：1的比例制好鹽水后，需將鹽水煮沸，其作用是除去鹽水中的氧氣和殺菌．
（2）為測(cè)定泡菜中亞硝酸鹽含量，首先要配制煙硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)顯色液，并與樣品進(jìn)行比較．泡菜制作的第3-5天亞硝酸鹽含量較高不宜食用，原因是適宜的pH、溫度和一定微生物作用下亞硝酸鹽轉(zhuǎn)變成致癌物質(zhì)亞硝胺．
（3）若將稀釋10⁵倍的某細(xì)菌菌液，用直接計(jì)數(shù)法和稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)．
①采用直接計(jì)數(shù)法時(shí)，應(yīng)該先蓋蓋玻片，再在蓋玻片的邊緣滴加培養(yǎng)液．
②采用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)時(shí)，為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，因此每升菌液中細(xì)菌數(shù)量=（40+154+156+152）÷4÷0.1×10⁵×10³=1.255×10¹¹個(gè)．
③由于直接計(jì)數(shù)法無論菌體死活均被計(jì)數(shù)，而稀釋涂布平板法當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，上述兩種計(jì)數(shù)法中，直接計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)獲得的細(xì)菌數(shù)量數(shù)目偏多，而稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)獲得的細(xì)菌數(shù)量偏少．
故答案為：
（1）除去鹽水中的氧氣和殺菌
（2）煙硝酸鹽    適宜的pH、溫度和一定微生物作用下亞硝酸鹽轉(zhuǎn)變成致癌物質(zhì)亞硝胺
（3）①蓋玻片
②1.255×10¹¹
③直接計(jì)數(shù)法    直接計(jì)數(shù)法無論菌體死活均被計(jì)數(shù)，而稀釋涂布平板法當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)、泡菜的制作，要求考生識(shí)記接種微生物常用的兩種方法，掌握計(jì)數(shù)微生物的方法及注意事項(xiàng)；識(shí)記測(cè)定亞硝酸鹽含量的原理，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．