Question

回答下列問題：
（1）PCR技術是一種DNA體外擴增技術．1988年，PCR儀問世，并被廣泛應用于基因擴增和DNA序列測定．右圖所示是PCR技術示意圖，請回答下列問題．
①引物是此過程中必須加入的物質，從化學本質上說，引物是一小段

 

．
②將雙鏈DNA

 

，使之變性，從而導致

 

．
③引物延伸需提供

 

作為原料．
（2）紅細胞含有大量血紅蛋白，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進行實驗，來提取和分離血紅蛋白，血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步：樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定．請回答下列有關問題：
①樣品處理，它包括紅細胞的洗滌、

 

、收集血紅蛋白溶液．
②收集的血紅蛋白溶液在透析袋中經(jīng)過透析，這就是樣品的粗分離，透析的目的是

 

，透析的原理是

 

．
③通過凝膠色譜法將樣品進一步純化，最后經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定，樣品純化的目的是

 

．

Answer 1

考點：PCR技術的基本操作和應用,蛋白質的提取和分離

專題：

分析：1、閱讀題干可知，該題的知識點是PCR技術和血紅蛋白的提取和分離實驗，先梳理相關知識點，然后結構題干信息進行解答．
2、PCR技術即多聚酶鏈式反應擴增DNA片段，其原理是利用DNA熱變性原理通過控制溫度控制DNA雙鏈的解聚與結合，從而實現(xiàn)DNA分子在體外快速復制．
3、血紅蛋白提取和分離的實驗步驟一般分為樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定四步；粗分離采用的方法是透析，由于透析袋是半透膜，可以允許小分子物質透過，而大分子物質留在袋內，從而除去分子量較小的雜質；凝膠色譜法純化蛋白質的原理是根據(jù)蛋白質分子量大小不同除去分子量較大的蛋白質：相對分子量小的蛋白質容易進入凝膠通道，路程較長，移動的速度慢，洗脫的次序靠后，分子量大的蛋白質不容易進入凝膠內部的通道，路程短，移動的速度快，先洗脫出來．

解答： 解：（1）①用PCR技術擴增DNA片段，需要引物，引物實質是一小段單鏈DNA或RNA．
②DNA分子在較高溫度如95℃條件下變性，雙鏈DNA分子解旋形成單鏈DNA．
③由于PCR技術的產(chǎn)物是DNA，因此要以四種脫氧核苷酸為原料．
（2）①血紅蛋白提取和分離的實驗中，樣品處理的步驟包括紅細胞的洗滌、血紅蛋白釋放、收集血紅蛋白溶液等．
②粗分離所用的方法是透析，由于透析袋是半透膜，可以允許小分子物質透過，而大分子物質留在袋內，從而除去分子量較小的雜質．
③凝膠色譜法將樣品純化蛋白質分子是根據(jù)不同蛋白質分子量不同除去分子量較大的蛋白質．
故答案為：
（1）①單鏈DNA或RNA　　 
②加熱到95℃雙鏈DNA分離成兩條單鏈　　
③四種脫氧核苷酸
（2）①血紅蛋白的釋放　　
②去除相對分子質量較小的雜質　　透析袋能使小分子自由進出，而大分子則保留在透析袋內　　
③通過凝膠色譜法將相對分子質量大的雜質蛋白除去

點評：本題旨在考查學生對PCR技術和血紅蛋白的提取和分離實驗的理解和掌握程度．