Question

【題目】我國飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定每毫升水樣中細(xì)菌總數(shù)不得大于100個，大腸桿菌不得檢出。某興趣小組為測定本地自來水中的細(xì)菌總數(shù)和是否有大腸桿菌，進(jìn)行了如下實驗：

①分別配制營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCI、瓊脂、H20）和伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基（成分：蛋白胨、NaCl、瓊脂、乳糖、伊紅、美藍(lán)、H2O），滅菌。

②取水樣。

③先測定甲項指標(biāo)：用滅菌吸管吸取ImL水樣，涂布到營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中；置于37 ℃培養(yǎng)24h后進(jìn)行菌落計數(shù)。另設(shè)一個不加水樣的空白對照組。

④用濾膜法測定乙項指標(biāo)，裝置和操作如下圖。

回答下列問題：

(1)步驟②取水樣前應(yīng)先將自來水龍頭用火焰灼燒3min，目的是_____。

(2)步驟③測定的指標(biāo)甲是__。水樣涂布前無需稀釋，理由是____。

(3)步驟④測定乙項指標(biāo)，主要觀察濾膜上是否會出現(xiàn) ___色菌落。配制伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基時，先用蛋白胨、NaCl、瓊脂配制基礎(chǔ)培養(yǎng)基，在l00kPa、121℃條件下滅菌后，冷卻至60。C左右，再加入經(jīng)70kPa、115℃條件下滅菌的乳糖、伊紅、美藍(lán)水溶液，后者滅菌條件不同的原因是____。

(4)興趣小組認(rèn)為合格的自來水中細(xì)菌數(shù)量很少，擔(dān)心檢測不到，因而將取得的水樣先加入到無瓊脂的營養(yǎng)培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時間后，再稀釋涂布平板計數(shù)。這樣操作獲得的數(shù)據(jù)___ （填“可信”或“不可信”）．理由是____。

Answer 1

【答案】滅菌 細(xì)菌總數(shù) 自來水中細(xì)菌數(shù)量很少 紫黑 溶液中的乳糖高溫下會破壞 不可信 細(xì)菌會在營養(yǎng)培養(yǎng)液中大量繁殖，其數(shù)量不能真實反映水樣中原有的數(shù)量

【解析】

本實驗應(yīng)用到瓊脂，是固體培養(yǎng)基，伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基是一種鑒別培養(yǎng)基，大腸桿菌在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上可呈現(xiàn)深紫色并帶有金屬光澤。題中指標(biāo)甲是細(xì)菌總數(shù)，指標(biāo)乙是大腸桿菌數(shù)。

（1）實驗過程要進(jìn)行嚴(yán)格的滅菌，水龍頭用火焰灼燒3min，目的就是滅菌。

（2）實驗過程首先要測定細(xì)菌的總數(shù)，再測定大腸桿菌數(shù)，因為自來水中細(xì)菌數(shù)量很少，所以水樣涂布前無需稀釋。

（3）指標(biāo)乙是大腸桿菌，大腸桿菌在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上會呈現(xiàn)紫黑色并帶有金屬光澤。后者滅菌條件比前者所需要的溫度及壓強(qiáng)都低，是因為后者操作過程加入了乳糖，溶液中的乳糖高溫下會破壞。

（4）若將水樣先加入到無瓊脂的營養(yǎng)培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時間后，則原有水樣中的細(xì)菌就會在培養(yǎng)液中繁殖，稀釋涂布平板計數(shù)得到的數(shù)量不能真實反映水樣中原有的數(shù)量，因此這樣操作獲得的數(shù)據(jù)是不可信的。