Question

普通棉花中含β-甘露糖苷酶基因（GhMnaA2），能在纖維細胞中特異性表達，產(chǎn)生的β-甘露糖苷酶催化半纖維素降解，棉纖維長度變短。為了培育新的棉花品種，科研人員構(gòu)建了反義GhMnaA2基因表達載體，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入棉花細胞，成功獲得轉(zhuǎn)基因棉花品種，具體過程如下。請分析回答：

（1）①和②過程中所用的限制性內(nèi)切酶分別是____________________、____________________。

（2）基因表達載體除了圖示組成外，至少還有____________________等（至少答兩個）。

（3）③過程中用酶切法可鑒定正、反義表達載體。用SmaⅠ酶和NotⅠ酶切正義基因表達載體獲得0.05kb、3.25kb、5.95kb、9.45kb四種長度的DNA片段，則用NotⅠ酶切反義基因表達載體獲得DNA片段的長度應(yīng)是____________________和____________________。

（4）④過程中利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化棉花細胞的過程中，整合到棉花細胞染色體DNA的區(qū)段是____________________，轉(zhuǎn)化后的細胞再通過____________________形成植物體。

（5）導(dǎo)入細胞內(nèi)的反義GhMnaA2轉(zhuǎn)錄的mRNA能與細胞內(nèi)的GhMnaA2轉(zhuǎn)錄的mRNA互補配對，從而抑制基因的表達，其意義是____________________。

Answer 1

【參考答案】

（1）HindⅢ、BamHⅠ   SmaⅠ（2）復(fù)制原點、終止子、標記基因等（3）6.0kb  12.7kb

（4）（含有E6啟動子和GhMnaA2基因的）T－DNA     植物組織培養(yǎng)

（5）阻止β-甘露糖苷酶合成，使棉纖維更長