Question

 48．普通棉花中含β-甘露糖苷酶基因（GhMnaA2），能在纖維細胞中特異性表達，產生的β-甘露糖苷酶催化半纖維素降解，棉纖維長度變短。為了培育新的棉花品種，科研人員構建了反義GhMnaA2基因表達載體，利用農桿菌轉化法導入棉花細胞，成功獲得轉基因棉花品種，具體過程如下。請分析回答：

（1）①和②過程中所用的限制性內切酶分別是                  、             。

（2）基因表達載體除了圖示組成外，至少還有  　 　          　等（至少答兩個）。

（3）③過程中用酶切法可鑒定正、反義表達載體。用SmaⅠ酶和NotⅠ酶切正義基因表達載體獲得0.05kb、3.25kb、5.95kb、9.45kb四種長度的DNA片段，則用NotⅠ酶切反義基因表達載體獲得DNA片段的長度應是  　 　和 　　  。

（4）④過程中利用農桿菌介導轉化棉花細胞的過程中，整合到棉花細胞染色體DNA的區(qū)段是            ，轉化后的細胞再通過                 形成植物體。

（5）導入細胞內的反義GhMnaA2轉錄的mRNA能與細胞內的GhMnaA2轉錄的mRNA互補配對，從而抑制基因的表達，其意義是                                        。

Answer 1

48、（1）HindⅢ、BamHⅠ   SmaⅠ（2）復制原點、終止子、標記基因等  （3）6.0kb  12.7kb

（4）（含有E6啟動子和GhMnaA2基因的）T－DNA     植物組織培養(yǎng)

（5）阻止β-甘露糖苷酶合成，使棉纖維更長