Question

8．下面是將某細(xì)菌的基因A導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)，制備“工程菌”的示意圖．

請(qǐng)據(jù)圖回答：
（1）獲得A有兩條途徑：一是以A的mRNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶酶的催化下，合成互補(bǔ)的單鏈DNA，然后在DNA聚合酶作用下合成雙鏈DNA，從而獲得所需基因；二是根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測(cè)出相應(yīng)的mRNA序列，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)其DNA的脫氧核苷酸序列，再通過化學(xué)方法合成所需基因．
（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí)，需要在反應(yīng)體系中添加的有機(jī)物質(zhì)有引物、模板（目的基因或A基因）、4種脫氧核苷酸三磷酸和耐熱性的DNA聚合酶，擴(kuò)增過程可以在PCR擴(kuò)增儀中完成．
（3）基因工程的核心是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，為保證基因A的正常轉(zhuǎn)錄，圖中C上基因A的兩端應(yīng)含有啟動(dòng)子、終止子．
（4）在基因工程中，常用Ca²⁺處理D，其目的是使其成為感受態(tài)細(xì)胞，使大腸桿菌更容易吸收重組DNA分子．
（5）基因A轉(zhuǎn)錄和表達(dá)產(chǎn)物的檢測(cè)分別采用分子雜交、抗原抗體雜交技術(shù)．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示是將某細(xì)菌的基因A導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)，制備“工程菌”的示意圖，其中A為目的基因，B為運(yùn)載體（質(zhì)粒），C為重組質(zhì)粒，D為受體細(xì)胞．

解答 解：（1）獲得A有兩條途徑：一是以A的mRNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化下，合成互補(bǔ)的單鏈DNA，然后在DNA聚合酶作用下合成雙鏈DNA，從而獲得所需目的基因；二是根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的序列，推測(cè)出相應(yīng)的mRNA序列，然后按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，推測(cè)其DNA的序列，再通過化學(xué)方法合成所需目的基因．
（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí)，需要在反應(yīng)體系中添加的有機(jī)物質(zhì)有引物、4種脫氧核苷酸、三磷酸腺苷和耐熱性的DNA聚合酶，擴(kuò)增過程可以在PCR擴(kuò)增儀中完成模板DNA．
（3）由A和載體B拼接形成C的過程通常稱為基因表達(dá)載體的構(gòu)建．基因表達(dá)載體的組成包括啟動(dòng)子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因等，為保證基因A的正常轉(zhuǎn)錄，圖中C上基因A的兩端應(yīng)含有啟動(dòng)子和終止子．
（4）在基因工程中，常用Ca²⁺處理D，其目的是使其成為感受態(tài)細(xì)胞，使大腸桿菌更容易吸收重組DNA分子．
（5）要檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞采用DNA分子雜交技術(shù)，要檢測(cè)目的基因是否表達(dá)，則采用抗原-抗體雜交技術(shù)．
故答案為：
（1）逆轉(zhuǎn)錄酶     氨基酸    脫氧核苷酸
（2）引物   模板（目的基因或A基因）
（3）基因表達(dá)載體     啟動(dòng)子、終止子（答不全不得分）
（4）使其成為感受態(tài)細(xì)胞，使大腸桿菌更容易吸收重組DNA分子
（5）分子雜交     抗原抗體雜交

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合制備“工程菌”的示意圖，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．