Question

【題目】葡萄酒酵母（C1)具有良好的發(fā)酵性能，但分解蘋果酸能力差，過多的蘋果酸會(huì)使葡萄酒有酸澀感，解蘋果酸裂殖酵母（Ml)具有極強(qiáng)的降解蘋果酸能；但發(fā)酵性能極差。為了培育新型酵母菌菌種，科研人員采用了以下步驟進(jìn)行育種。請(qǐng)分析回答：

（1）步驟一：制備原生質(zhì)體。培養(yǎng)Cl、Ml單倍體親株，加入一定量的0.5%的蝸牛酶液，保溫處理一段時(shí)間，用一定濃度的高滲緩沖液洗滌，以確保獲得更多的原生質(zhì)體。

①本實(shí)驗(yàn)中，蝸牛酶液的作用是______________。

②在無菌條件下，用___________(A：高滲緩沖液、B:低滲緩沖液、C：生理鹽水）洗滌，以確保獲得更多的原生質(zhì)體。

③改變蝸牛酶液濃度進(jìn)行多組實(shí)驗(yàn)，結(jié)果見圖1,分別計(jì)算酶濃度為1和1.5時(shí)的形成率與再生率，相比較酶濃度為_______________時(shí)更適宜。

（2）步驟二：誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合。取Cl、Ml原生質(zhì)體懸浮液等量混合，離心去除上清液，加入一定量40%的_________溶液,30℃保溫20min，鏡檢并觀察融合情況。

（3）步驟三：融合子的鑒定。測(cè)定細(xì)胞體積及DNA含量，結(jié)果見表1,從中挑選出融合子Z13、Z15、Z19、Z29,理由是_____________。

（4）步驟四：融合子發(fā)酵性能的測(cè)定。測(cè)定融合子與親株的降糖能力和降酸能力，圖2和圖3是對(duì)Z29和親株的測(cè)定結(jié)果，據(jù)圖分析可以得出的結(jié)論是__________的降糖能力和降酸能力均較好，表明 _________。

Answer 1

【答案】 去除細(xì)胞壁 A 1.5% 聚乙二醇（PEG） 細(xì)胞中DNA含量與兩親本的DNA含量之和接近（DNA含量為4或DNA含量在4左右、接近4） Z29 融合了兩親株的優(yōu)良性狀

【解析】試題分析：本題考查細(xì)胞工程，考查對(duì)細(xì)胞融合方法的理解與識(shí)記，考查圖表曲線的分析能力。解答此類題目應(yīng)明確研究目的和研究對(duì)象，從曲線圖或表格中提取相關(guān)信息。

（1）①酵母菌具有細(xì)胞壁，本實(shí)驗(yàn)中，蝸牛酶液的作用是去除細(xì)胞壁。

②在無菌條件下，用高滲緩沖液洗滌，可以避免原生質(zhì)體不破裂，以確保獲得更多的原生質(zhì)體。

③酶濃度為1.5％時(shí)再生率較高，更適宜進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

（2）步驟二：聚乙二醇（PEG）可以促進(jìn)細(xì)胞融合。

（3）融合子Z13、Z15、Z19、Z29細(xì)胞中DNA含量與兩親本的DNA含量之和接近（DNA含量為4或DNA含量在4左右、接近4），屬于雜合細(xì)胞。

（4）據(jù)圖2可知，Z29比M1降糖能力強(qiáng)，具圖3可知，Z29降酸能力比雙親均強(qiáng)，說明Z29的降糖能力和降酸能力均較好，表明Z29融合了兩親株的優(yōu)良性狀。