Question

下圖是利用質(zhì)粒（有抗四環(huán)素基因、抗氨芐青霉素基因和Sal I、BamH I、Hind Ⅲ三種限制酶切割位點(diǎn)）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的培育過程，請據(jù)圖回答有關(guān)問題：

（1）將抗鹽基因?qū)�入煙草�?xì)胞內(nèi)，使煙草植株產(chǎn)生抗鹽性狀，這種新性狀的產(chǎn)生所依據(jù)的原理是           。從基因文庫中獲得的抗鹽基因可用          技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。

（2）如果將抗鹽基因直接導(dǎo)入煙草細(xì)胞，一般情況下，煙草不會(huì)具有抗鹽特性，原因是抗鹽基因在煙草細(xì)胞中不能               ，也不能合成抗鹽基因的mRNA。

（3）為了確定抗鹽煙草是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的             作探針進(jìn)行分子雜交檢測，又要用一定濃度的鹽水澆灌的方法從個(gè)體水平鑒定煙草植株的耐鹽性。

（4）圖中將抗鹽基因?qū)�入質(zhì)粒，需用             限制酶對質(zhì)粒和                 進(jìn)行切割。

（5）煙草組織細(xì)胞具有                 ，因此，可以利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗鹽基因的煙草組織細(xì)胞培育成植株。圖中①、②依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細(xì)胞的              、                    。在形成愈傷組織的過程中，細(xì)胞的新陳代謝類型是                 。

Answer 1

(1) 基因重組（1分）    PCR （1分）

(2) 復(fù)制（2分）  

(3) 抗鹽基因（2分）

(4) Sal I和Hind III（2分）   含抗鹽基因的DNA  （2分）

(5) 全能性（1分）   脫分化（1分）    再分化（1分）     異養(yǎng)需氧型（2分）

考查基因工程的知識(shí)。BamHI的酶切位點(diǎn)在目的基因（抗鹽基因）中。若用此限制酶，會(huì)破壞目的基因的結(jié)構(gòu)，最終得不到轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草，所以選用 SalⅠ和HindⅢ對質(zhì)粒和含抗鹽基因的DNA進(jìn)行切割。由于SalⅠ和HindⅢ的酶切位點(diǎn)在抗四環(huán)素基因中。在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，抗四環(huán)素基因結(jié)構(gòu)遭到破壞，故只能在培養(yǎng)基中加入氨芐青霉素來篩選導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌。采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)可將植物細(xì)胞培育成完整的植株。植物組織培養(yǎng)過程中，愈傷組織經(jīng)細(xì)胞增殖和分化形成完整植株，此過程須向培養(yǎng)基中加入植物激素（如生長素和細(xì)胞分裂素）。