Question

【題目】肥胖已經(jīng)嚴重危害人類健康。為研究發(fā)酵大麥提取物對3T3-L1前脂肪細胞分化的影響，科研人員進行了相關(guān)實驗。

（1）3T3-L1前脂肪細胞在胰島素（INS）、地塞米松（DEX）和3-異丁基-1-甲基-黃嘌呤（IBMX）的誘導下，基因___________表達，分化為成熟脂肪細胞，因此經(jīng)過三種物質(zhì)誘導的3T3-L1前脂肪細胞是肥胖研究常用的細胞模型。

（2）3T3-L1前脂肪細胞培養(yǎng)液中除了具有基本的營養(yǎng)外，還需加入一定量的___________，并置于_______________ 中培養(yǎng)。

（3）將一定數(shù)目的植物乳桿菌接種到經(jīng)過_________處理的粉碎過篩大麥和水的混合液中，制備發(fā)酵大麥提取物（LFBE）。除不接種植物乳桿菌外，其余操作方法相同，制備未發(fā)酵大麥提取物（RBE）。

（4）研究發(fā)酵大麥提取物對細胞分化的影響，實驗處理及結(jié)果如下。（表格中+表示加入了該物質(zhì)，-表示未加入）

①表格處理方法1、2、3分別是_____________、_____________、 ________________。

②分析實驗結(jié)果，說明__________________________________________________。

（5）為進一步研究LFBE抑制3T3-L1前脂肪細胞分化的機理，科研人員提取各組細胞中總RNA，經(jīng)___________過程獲得cDNA，再利用PCR技術(shù)擴增出肥胖相關(guān)基因。在相同條件下，PCR產(chǎn)物的量可以間接反映細胞中 __________________的含量。若檢測結(jié)果是______________，則說明LFBE抑制相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄從而抑制3T3-L1前脂肪細胞分化。

Answer 1

【答案】 選擇性 動物血清（可換成抗生素以防止污染） CO2（恒溫）培養(yǎng)箱 （高壓蒸汽）滅菌 地塞米松和3-異丁基-1-甲基-黃嘌呤 未發(fā)酵大麥提取物 發(fā)酵大麥提取物 發(fā)酵大麥提取物明顯抑制3T3-L1前脂肪細胞分化且隨濃度增加，抑制能力加強 逆轉(zhuǎn)錄 【答題空10】肥胖相關(guān)基因mRNA LFBE組肥胖相關(guān)基因mRNA數(shù)量明顯低于模型組和RBE組，高于空白組

【解析】試題分析：本題以柱形圖和曲線圖為載體，考查發(fā)酵大麥提取物對3T3-L1前脂肪細胞分化的影響的相關(guān)實驗探究，識記細胞分化的實質(zhì)，結(jié)合對照實驗的原則，以及對柱形圖中的實驗結(jié)果進行分析，從而得出相應實驗結(jié)論。

（1）細胞分化是基因選擇性表達的結(jié)果。

（2）細胞培養(yǎng)液中除了具有基本的營養(yǎng)外，還需加入一定量的動物血清（可換成抗生素以防止污染），并置于 CO2（恒溫）培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

（3）大麥和水的混合液是用來培養(yǎng)植物乳桿菌的培養(yǎng)基，在接種之前，培養(yǎng)基需要滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。

（4）①本實驗是研究發(fā)酵大麥提取物對細胞分化的影響，根據(jù)題（1）中“3T3﹣L1前脂肪細胞在胰島素（INS）、地塞米松（DEX）和3﹣異丁基﹣1﹣甲基﹣黃嘌呤（IBMX）的誘導下，分化為成熟脂肪細胞”題（3）中“植物乳桿菌接種到粉碎過篩大麥和水的混合液中，制備發(fā)酵大麥提取物（LFBE）”等相關(guān)信息可推知，表格處理方法1、2、3分別是INS．DEX．IBMX、RBE、LFBE。

②根據(jù)柱形圖，分析實驗結(jié)果，說明LFBE明顯抑制3T3﹣L1前脂肪細胞分化率且隨濃度增加，抑制能力加強。

（5）RNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄過程獲得cDNA．PCR產(chǎn)物的量可以間接反映細胞中肥胖相關(guān)基因mRNA的含量．若檢測結(jié)果是 LFBE組肥胖相關(guān)基因mRNA數(shù)量明顯低于模型組和RBE組，高于空白組，則說明LFBE抑制相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄從而抑制3T3﹣L1前脂肪細胞分化。