Question

2．飼養(yǎng)動物常用的植物飼料中含有難溶的植酸鈣等物質(zhì)，很難被動物吸收利用，還影響對其他營養(yǎng)物質(zhì)的利用．若在飼料中添加植酸酶，則能催化其水解成為可以吸收利用的磷酸鹽等．以下是科研人員從作物根部土壤中分離產(chǎn)植酸梅的菌株的過程示意圖．請分析作答．

（1）圖示培養(yǎng)基中除了添加植酸鈣以外，應(yīng)含有碳源、氮源、水、其他無機鹽等基本營養(yǎng)物質(zhì)．
（2）接種以前要進行系列稀釋操作，目的是在固體供養(yǎng)基表面形成單個菌落．根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)就能大致推測出樣品中的活菌數(shù)．通常每種稀釋液需涂布三個平板，取其平均值．若將最后一個試管中的菌液每次吸取 0．lmL涂布培養(yǎng)后獲得平均值是48個菌落，則lg土壤中含有此菌的菌株數(shù)是4.8×10⁷．
（3）在樣品稀釋和涂布平板步驟中，下到選項不需要的是③（填序號）．
①酒精    ②培養(yǎng)皿   ③顯微鏡    ④無菌水
（4）在涂布平板時，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多的原因是培養(yǎng)基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果．
（5）產(chǎn)值酸梅的菌株會水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)值酸酶．圖中降解圈大小與植酸酶的量與活性有關(guān)．實驗結(jié)果顯示A-E五種菌株中，E是產(chǎn)值酸酶最理想的菌株．分離并獲得菌種后，若需長期保存，應(yīng)使用甘油管藏法．

Answer 1

分析 1、稀釋平板法在培養(yǎng)基上分離、培養(yǎng)出微生物的單個菌落，以便于計數(shù)、移植、分離，從而達到純培養(yǎng)的目的．
2、選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長，促進所需要的微生物的生長．由于植酸鈣的不溶解性，使培養(yǎng)基中形成白色渾濁．產(chǎn)植酸酶的菌株會水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)植酸酶．

解答 解：（1）從作物根部土壤中分離產(chǎn)植酸酶的菌株需要使用含植酸鈣的選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中應(yīng)含有碳源、氮源、水、無機鹽等基本營養(yǎng)物質(zhì)?
（2）接種以前要進行的一系列操作，即稀釋平板法培養(yǎng)出微生物的單個菌落，達到純培養(yǎng)的目的．采用稀釋涂布平板法進行微生物的計數(shù)時需要至少3個平板統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)取其平均值．最后一個試管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培養(yǎng)后獲得平均值是48則1g土壤中含有活菌數(shù)為48×10×10³×10²═4.8×10⁷?
（3）在樣品稀釋和涂布平板步驟中需要進行消毒，使用酒精，稀釋涂布平板需要培養(yǎng)皿和無菌水，但不需要顯微鏡．故選：③．
（4）在涂布平板時，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多的原因是培養(yǎng)基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果．
（5）由于植酸鈣的不溶解性，使培養(yǎng)基中形成白色渾濁．產(chǎn)植酸酶的菌株會水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域．根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)植酸酶及降解圈大小與植酸酶的量與活性有關(guān)，故圖中E是產(chǎn)植酸酶最理想的菌株?長期保存菌種，應(yīng)使用甘油管藏法．
故答案為：
（1）植酸鈣
（2）單個菌落  菌落數(shù)      4.8×10⁷ 
（3）③
（4）培養(yǎng)基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果（不易培養(yǎng)得到單個菌落）
（5）量與活性     E   甘油管藏

點評 本題綜合微生物的培養(yǎng)及實驗設(shè)計和分析能力，意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運用所學(xué)知識與觀點，對實驗現(xiàn)象和結(jié)果進行解釋、分析、處理．