Question

【題目】人血清白蛋白(HSA)具有重要的醫(yī)用價(jià)值，只能從血漿中制備。下圖是以基因工程技術(shù)獲取重組HSA(rHSA)的兩條途徑。

(1)為獲取HSA基因，首先需采集人的血液，提取________合成總cDNA，然后以cDNA為模板，采用PCR技術(shù)擴(kuò)增HSA基因。下圖中箭頭表示一條引物結(jié)合模板的位置及擴(kuò)增方向，請用箭頭在方框內(nèi)標(biāo)出另一條引物的位置及擴(kuò)增方向__________。

(2)啟動(dòng)子通常具有物種及組織特異性，構(gòu)建在水稻胚乳細(xì)胞內(nèi)特異表達(dá)rHSA的載體，需要選擇的啟動(dòng)子是________。

A.人血細(xì)胞啟動(dòng)子 B.水稻胚乳細(xì)胞啟動(dòng)子

C.大腸桿菌啟動(dòng)子 D.農(nóng)桿菌啟動(dòng)子

(3)利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細(xì)胞的過程中，需添加酚類物質(zhì)，其目的是_______________。

(4)人體合成的初始HSA多肽，需要經(jīng)過膜系統(tǒng)加工形成正確的空間結(jié)構(gòu)才能有活性。與途徑Ⅱ相比，選擇途徑Ⅰ獲取rHSA的優(yōu)勢是_____________________。

(5)為證明rHSA具有醫(yī)用價(jià)值，須確認(rèn)__________________________。

Answer 1

【答案】總RNA （或mRNA） B 吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細(xì)胞，有利于目的基因成功轉(zhuǎn)化 水稻是真核生物，具有膜系統(tǒng)，能對(duì)初始rHSA多肽進(jìn)行高效加工 rHSA與HSA的生物學(xué)功能一致

【解析】

由圖可知，途徑Ⅰ是將人血清白蛋白基因與運(yùn)載體結(jié)合導(dǎo)入農(nóng)桿菌中，借助農(nóng)桿菌感染水稻受體細(xì)胞，將目的基因?qū)�入水稻�?xì)胞中，并經(jīng)過植物組織培養(yǎng)獲得轉(zhuǎn)基因水稻，人血清白蛋白基因在水稻的胚乳細(xì)胞中表達(dá)形成人血清白蛋白。途徑Ⅱ是將人的血清白蛋白基因與運(yùn)載體結(jié)合后導(dǎo)入大腸桿菌，借助大腸桿菌繁殖速度快的特點(diǎn)，可在大腸桿菌中獲得大量的人血清白蛋白。

（1）為獲取HSA基因，首先需采集人的血液，提取mRNA通過反轉(zhuǎn)錄法合成總cDNA，然后以cDNA為模板，采用PCR技術(shù)擴(kuò)增HSA基因。由于DNA兩條鏈?zhǔn)欠聪蚱叫械模瑥?fù)制時(shí)也是方向相反的，如圖中箭頭表示一條引物結(jié)合模板的位置及擴(kuò)增方向，則另一條引物位于另一條鏈的相反一端。如圖所示。

（2）啟動(dòng)子是RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)，能啟動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄，若構(gòu)建在水稻胚乳細(xì)胞內(nèi)特異表達(dá)rHSA的載體，需要選擇水稻胚乳細(xì)胞啟動(dòng)子才能使目的基因在胚乳細(xì)胞中特異性表達(dá)。故B符合題意，ACD不符合題意。

（3）利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化水稻受體細(xì)胞的過程中，需添加酚類物質(zhì)，其目的是吸引農(nóng)桿菌移向水稻受體細(xì)胞，有利于目的基因成功轉(zhuǎn)化。
（4）由于大腸桿菌為原核生物，無生物膜系統(tǒng)，而水稻為真核生物，具有生物膜系統(tǒng)，故在合成rHAS時(shí)，與途徑Ⅱ相比，選擇途徑I獲取rHSA的優(yōu)勢是：水稻是真核生物，具有膜系統(tǒng)，能對(duì)初始rHSA多肽進(jìn)行高效加工。
（5）為證明rHSA具有醫(yī)用價(jià)值，需對(duì)基因工程的產(chǎn)物進(jìn)行鑒定，即確認(rèn)rHSA與HSA的生物學(xué)功能一致。