Question

【題目】2016年9月15日天宮二號在酒泉衛(wèi)星發(fā)射中心發(fā)射成功，高等植物擬南芥就幸運地當(dāng)選為“植物航天員”。多年來圍繞擬南芥的相關(guān)研究很多，尤其是對于擬南芥轉(zhuǎn)基因研究非常熱門，當(dāng)前擬南芥轉(zhuǎn)基因所使用的方法主要是農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化，在擬南芥搭載升空前植物學(xué)家預(yù)先用轉(zhuǎn)基因技術(shù)給擬南芥體細(xì)胞用綠色熒光蛋白（GFP）基因標(biāo)記。

（1）該綠色熒光蛋白（GFP）基因取自某種生物的cDNA文庫。若想短時間內(nèi)得到大量的綠色熒光蛋白（GFP）基因，所用技術(shù)的中文名稱是_____________，其條件除了原料、能量、模板外還需要加入_________、____________。

（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法中Ti質(zhì)粒的T-DNA（可轉(zhuǎn)移的DNA）可整合到植物細(xì)胞中___________上，所以構(gòu)建基因表達載體時，需將目的基因插入到T-DNA序列中，該過程用到的工具酶有________________。

（3）通常采用____________技術(shù)檢測綠色熒光蛋白（GFP）基因是否插入到擬南芥基因組中。若將含有綠色熒光蛋白（GFP）基因的擬南芥細(xì)胞培育出完整植株，需要運用的主要生物技術(shù)是____________，該技術(shù)的理論基礎(chǔ)是___________________。

Answer 1

【答案】 PCR(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)) 技術(shù) 引物 Taq酶（或耐高溫的DNA聚合酶） 染色體DNA 限制酶和DNA連接酶 DNA 分子雜交技術(shù) 植物組織培養(yǎng) 植物細(xì)胞的全能性

【解析】試題分析：因工程中：常用限制性核酸內(nèi)切酶獲取目的基因，為了獲得大量目的基因，可以PCR技術(shù)；構(gòu)建基因表達載體常用DNA連接酶將目的基因與質(zhì)粒相連；常用顯微注射技術(shù)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受精卵；檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，可采用DNA分子雜交法。

（1）利用PCR技術(shù)，可以短時間內(nèi)得到大量的綠色熒光蛋白（GFP）基因，該過程除了原料、能量、模板外，還需要加入引物、耐高溫的DNA聚合酶。

（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法中Ti質(zhì)粒的T-DNA（可轉(zhuǎn)移的DNA）可整合到植物細(xì)胞中染色體DNA上。構(gòu)建基因表達載體時，將目的基因插入到T-DNA序列中，需要用到的工具酶有限制酶和DNA連接酶。

（3）檢測綠色熒光蛋白（GFP）基因是否插入到擬南芥基因組中，常用DNA 分子雜交技術(shù)。若將含有綠色熒光蛋白（GFP）基因的擬南芥細(xì)胞培育出完整植株，需要運用的主要生物技術(shù)是植物組織培養(yǎng)，其原理是植物細(xì)胞的全能性。