Question

【題目】人血清蛋白（HSA)具有重要的醫(yī)用價(jià)值。下圖是以基因工程技術(shù)獲取重組HSA（rHSA）的兩條途徑。

(1)如果HSA基因序列未知，可以采用____________的方法獲取該目的基因，為了使目的基因能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制和穩(wěn)定保存，通常要先構(gòu)建_____________后才能導(dǎo)入宿主細(xì)胞。

(2)方框中的“？”一般選用的生物是________,為了提高II過程的導(dǎo)入成功率，通常用________處理大腸桿菌。

(3)人體合成的初始HSA多肽，需要經(jīng)過膜系統(tǒng)加工形成正確的空間結(jié)構(gòu)才能有活性，所以，選擇_____途徑（填I(lǐng)或II)獲取rHSA更有優(yōu)勢。

(4)為了鑒定宿主細(xì)胞中是否產(chǎn)生rHSA,可以用_____________方法來進(jìn)行檢驗(yàn)。

A.檢驗(yàn)HSA基因是否導(dǎo)入

B.檢驗(yàn)細(xì)胞中是否產(chǎn)生相應(yīng)的mRNA

C.抗原、抗體雜交

D.檢測是否有標(biāo)記基因

Answer 1

【答案】 從基因文庫中提取 重組DNA 農(nóng)桿菌 氯化鈣 I C

【解析】試題分析：據(jù)圖分析，I過程將目的基因?qū)�入的是植物�?xì)胞，一般采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，示意圖中？表示的是農(nóng)桿菌；II過程的受體細(xì)胞是大腸桿菌，而大腸桿菌是原核生物，細(xì)胞中沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，所以該過程產(chǎn)生的蛋白質(zhì)一般沒有生物活性。

（1）如果HSA基因序列未知，則不能人工方法合成或通過PCR技術(shù)擴(kuò)增，則只能采用從基因文庫中提取的方法獲取該目的基因；為了使目的基因能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制和穩(wěn)定保存，通常要先構(gòu)建基因表達(dá)載體（重組DNA）后才能導(dǎo)入宿主細(xì)胞。

（2）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，因此方框中的“？”一般選用的生物是農(nóng)桿菌；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞時(shí)常有感受態(tài)細(xì)胞法，即用氯化鈣處理微生物細(xì)胞，使之成為易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)。

（3）由于大腸桿菌是原核生物，其細(xì)胞中不含內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，而人體合成的初始HSA多肽，需要經(jīng)過膜系統(tǒng)加工形成正確的空間結(jié)構(gòu)才能有活性，所以選擇I途徑獲取rHSA更有優(yōu)勢。

（4）檢測目的基因是否表達(dá)形成蛋白質(zhì)可以采用抗原-抗體雜交法。