Question

【題目】【生物一選修3現(xiàn)代生物科技專題】

艾滋病病毒（HIV)外殼的包膜上有多種蛋白質(zhì)，其中包膜糖蛋白（env)基因編碼gpl60蛋白，進(jìn)一步加工成gpl20蛋白，具有較強(qiáng)的抗原性。制備抗HIV gpl20的單克隆抗體，為艾滋病的治療帶來希望。請回答下列問題：

(1)若利用動物細(xì)胞工程制備抗HIV gpl20的單克隆抗體，涉及到的技術(shù)手段主要有______________。

(2)細(xì)胞融合常用的生物誘導(dǎo)劑是_________。融合后需要用特定的選擇性培養(yǎng)基篩選，只有融合的_____才能生長，這種細(xì)胞的特點(diǎn)是__________。

(3)若要大量制備該單克隆抗體，可將篩選出來的細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，在培養(yǎng)液中通入一定濃度的C02，主要作用是_________________。

(4)科研人員設(shè)想用基因工程制備能表達(dá)抗HIV gpl20抗體的重組細(xì)胞，獲得目的基因可利用PCR技術(shù)擴(kuò)增，需要在反應(yīng)體系中添加的有機(jī)物有__________、Taq酶和4種脫氧核苷酸。利用_______法將目的基因?qū)�入骨髓瘤�?xì)胞。基因工程的核心是__________________。

Answer 1

【答案】 動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、動物細(xì)胞融合技術(shù) 滅活的病毒 雜種細(xì)胞 既能大量繁殖，又能產(chǎn)生抗HIV gpl20抗體 維持培養(yǎng)液的pH 引物和模板DNA 顯微注射 基因表達(dá)載體的構(gòu)建

【解析】試題分析：單克隆抗體即把產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，形成雜交瘤細(xì)胞，既有骨髓瘤細(xì)胞無限生長的能力，又有B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的功能。能在細(xì)胞培養(yǎng)中產(chǎn)生大量單一類型的高純度抗體。單克隆抗體技術(shù)的應(yīng)用，是免疫學(xué)中的一次革命，與常規(guī)的多克隆抗體相比，特異性更強(qiáng)，靈敏度更高，并且便于大規(guī)模重復(fù)生產(chǎn)，優(yōu)越性非常明顯。目前已廣泛應(yīng)用于科研、檢測、醫(yī)藥等各個領(lǐng)域。

（1）利用細(xì)胞工程制備單克隆抗體涉及到的技術(shù)有動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、動物細(xì)胞融合技術(shù)。

（2）與植物原生質(zhì)體融合相比，動物常用的誘導(dǎo)方法是用滅活的病毒誘導(dǎo)。融合后有多種融合細(xì)胞，需要用選擇培養(yǎng)基選擇其中的雜種細(xì)胞，這種細(xì)胞不僅大量繁殖，還可以產(chǎn)生抗HIV gpl20抗體。

（3）動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，加入二氧化碳的目的是維持培養(yǎng)液的Ph。

（4）PCR擴(kuò)增技術(shù)過程中，反應(yīng)體系中需要加入多種有機(jī)物，如引物、模板DNA、 Taq酶和4種脫氧核苷酸�；�因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)載體，將目的基因?qū)�入骨髓瘤�?xì)胞（動物細(xì)胞）的方法是顯微注射法。