Question

17．表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)，下列敘述不正確的是（　�。�

限制酶	BamHⅠ	HindⅢ	EcoRⅠ	SmaⅠ
識(shí)別序列及切割位點(diǎn)	G↓GATCC CCTAG↑G	A↓AGCTT TTCGA↑A	G↓AATTC CTTAA↑G	CCC↓GGG GGG↑CCC

• A． 圖中質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割后含有4個(gè)游離的磷酸基團(tuán)
• B． 若對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越高
• C． 抗生素抗性基因的作用是為了鑒別和篩選含有目的基因的細(xì)胞
• D． 用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒和外源DNA比只用EcoRⅠ一種酶更好

Answer 1

分析 圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)Sma l切割后，含2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的Smal酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越高，G與C形成三個(gè)氫鍵．?dāng)嗔严�耗能量多，穩(wěn)定性強(qiáng)，用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不可使用Smal切割，其切割時(shí)把標(biāo)記基因破壞了，構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，要使用DNA連接酶和限制酶．
質(zhì)粒和目的基因兩端的粘性末端相同，用連接酶連接時(shí)，會(huì)產(chǎn)生質(zhì)粒和目的基因自身連接物，而利用BamHⅠ和HindⅢ剪切時(shí)，質(zhì)粒和目的基因兩端的粘性末端不同，用DNA連接酶連接時(shí)，不會(huì)產(chǎn)生自身連接產(chǎn)物．

解答 解：A、質(zhì)粒分子是環(huán)狀的DNA分子，沒(méi)有切割之前不含游離的磷酸基團(tuán)，經(jīng)SmaⅠ切割前后，形成2個(gè)平末端，鏈狀DNA分子中含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，A錯(cuò)誤；
B、C和G之間含有3個(gè)氫鍵，A和T之間含有2個(gè)氫鍵，所以C和G含量越多，DNA分子熱穩(wěn)定性越高；SmaⅠ酶的識(shí)別序列的C和G含量較高，所以對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造時(shí)，插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越高，B正確；
C、抗生素抗性基因的作用是為了鑒別和篩選含有目的基因的細(xì)胞，C正確；
D、BamHⅠ和HinRⅢ兩種限制酶切割產(chǎn)生的黏性末端不同，若用這兩種限制酶同時(shí)處理外源DNA和質(zhì)粒，再用DNA連接酶連接兩者時(shí)，可避免切割的外源DNA、質(zhì)粒的粘性末端自身環(huán)化，D正確．
故選：A．

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合基因結(jié)構(gòu)圖和運(yùn)載體結(jié)構(gòu)圖，考查基因工程的技術(shù)和原理，重點(diǎn)是限制酶和DNA連接酶，要求考生認(rèn)真分析圖1和圖2，能根據(jù)圖中和表中信息選擇合適的限制酶，準(zhǔn)確判斷使用DNA連接酶連接的結(jié)果，再運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)答題．