Question

14．糖尿病是一種常見病，且發(fā)病率有逐年上升的趨勢．下圖是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)胰島素的操作過程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）過程②所需的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶．
（2）能否利用人的皮膚細(xì)胞來完成①的過程？不能，原因是皮膚細(xì)胞中的胰島素基因未表達(dá)，不能形成mRNA．
（3）在利用AB獲得C的過程中，通常必須使用同一種限制性核酸內(nèi)切酶同時(shí)切割A(yù)和B，使其產(chǎn)生相同的黏性末端，再加入DNA連接酶，才可以形成C．
（4）過程⑧用Ca²⁺對(duì)大腸桿菌進(jìn)行處理，使其處于感受態(tài)．
（5）能使人胰島素基因在大腸桿菌中表達(dá)的調(diào)控序列是啟動(dòng)子，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)．
（6）為了便于篩選重組質(zhì)粒，構(gòu)建的基因表達(dá)載體中需含有標(biāo)記基因．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)胰島素的操作過程示意圖．圖中①表示從胰島B細(xì)胞中獲取胰島素mRNA的過程；②為逆轉(zhuǎn)錄過程，A為胰島素基因；③④⑤表示目的基因的擴(kuò)增過程；⑥表示用限制酶切割運(yùn)載體形成黏性末端的過程；⑦表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；⑧表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過程；⑨表示目的基因隨著受體細(xì)胞的增殖和擴(kuò)增；⑩是從培養(yǎng)液中獲取胰島素的過程．

解答 解：（1）②為逆轉(zhuǎn)錄過程，需要逆轉(zhuǎn)錄酶的參與．
（2）①是獲取胰島素mRNA的過程，由于基因是選擇性表達(dá)的，人的皮膚細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄出胰島素mRNA，因此不能利用人的皮膚細(xì)胞來完成①過程．
（3）構(gòu)建基因表達(dá)載體的過程中，必須用相同的限制酶切割A(yù)（含目的基因的外源DNA分子）和B（運(yùn)載體）以產(chǎn)生相同的黏性末端，再加入DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體連接形成C（重組DNA分子）．
（4）將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞常用感受態(tài)轉(zhuǎn)化法，即過程⑧用Ca²⁺對(duì)大腸桿菌進(jìn)行處理，使其處于感受態(tài)．
（5）能使人胰島素基因在大腸桿菌中表達(dá)的調(diào)控序列是啟動(dòng)子，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)．
（6）為了便于篩選重組質(zhì)粒，構(gòu)建的基因表達(dá)載體中需含有標(biāo)記基因．
故答案為：
（1）逆轉(zhuǎn)錄
（2）不能    皮膚細(xì)胞中的胰島素基因未表達(dá)，不能形成mRNA．
（3）同一種限制性核酸內(nèi)切酶   DNA連接
（4）Ca²⁺
（5）啟動(dòng)子
（6）標(biāo)記基因

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)胰島素的操作過程示意圖，考查基因工程、遺傳信息的轉(zhuǎn)錄和翻譯、細(xì)胞分化等知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的工具及操作步驟，能準(zhǔn)確判斷圖中各過程或物質(zhì)的名稱；識(shí)記遺傳信息轉(zhuǎn)錄和翻譯的過程，掌握密碼子的特點(diǎn)，能運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)結(jié)合圖中信息答題．