Question

（10分）人組織纖溶酶原激活物（htPA）是一種重要的藥用蛋白，可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下：

（1）htPA基因與載體用______________切割后，通過DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體。檢測目的基因是否已插入受體細(xì)胞DNA，可采用______________技術(shù)。

（2）為獲取更多的卵（母）細(xì)胞，要對供體母羊注射 ，使其__________。采集的精子需要經(jīng)過__________，才具備受精能力。

（3）將重組表達(dá)載體導(dǎo)入受精卵常用的方法是__________。為了獲得母羊，移植前需對已成功轉(zhuǎn)入目的基因的胚胎進(jìn)行__________。利用 技術(shù)可獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體，這體現(xiàn)了早期胚胎細(xì)胞的__________。

（4）若在轉(zhuǎn)ht-PA基因母羊的羊乳中檢測到__________，說明目的基因成功表達(dá)。

 

Answer 1

（1）同種限制性核酸內(nèi)切酶（或同種限制酶）； DNA分子雜交

（2）促性腺激素 超數(shù)排卵； 獲能（處理）

（3）顯微注射法； 性別鑒定； 胚胎分割和胚胎移植 全能性

（4）htPA（或人組織纖溶酶原激活物）

【解析】

試題分析：

（1）在基因工程中，構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，把目的基因與運(yùn)載體一般用同種限制酶進(jìn)行切割，再用DNA連接酶連接，以構(gòu)建基因表達(dá)載體；乳腺生物反應(yīng)器需要把藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起。

（2）超數(shù)排卵處理時(shí)，需要注射促性腺激素；采集的精子必須經(jīng)過獲能處理后才具備受精能力。

（3）將重組DNA分子導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞的方法是顯微注射法；檢測目的基因是否已經(jīng)插入受體細(xì)胞的DNA，可采用DNA分子雜交技術(shù)；為了獲得母羊，胚胎移植前需要對胚胎進(jìn)行性別鑒定；移植后的胚胎能在受體母羊的子宮內(nèi)存活的生理學(xué)基礎(chǔ)是受體子宮對外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)；利用胚胎分割和胚胎移植技術(shù)可以獲得多個(gè)轉(zhuǎn)基因個(gè)體，這體現(xiàn)了早期胚胎細(xì)胞的全能性。

（4）目的基因基因成功表達(dá)的標(biāo)志是htPA基因（目的基因）在母羊的羊乳細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄翻譯出相應(yīng)的蛋白質(zhì)（人組織纖溶酶原激活物）

考點(diǎn)：本題考查基因工程的有關(guān)知識，意在考查考生識圖能力和理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。