Question

PCR技術(shù)是把DNA片段在體外酶的作用下，合成許許多多相同片段的一種方法，利用它能快速而特異地擴(kuò)增任何要求的目的基因或DNA分子片段，它的基本過程如圖所示：
圖中■表示每次擴(kuò)增過程中需要的引物．每個引物約含20個核苷酸，并分別與DNA片段兩端堿基互補(bǔ)，其作用是引導(dǎo)合成DNA子鏈．
（1）PCR技術(shù)的原理是模擬生物體內(nèi)

 

的過程．
（2）PCR擴(kuò)增過程中需要對DNA片段進(jìn)行高溫處理，其目的是

 

，此過程在生物體內(nèi)稱為

 

，需

 

 酶的參與．
（3）假如引物都用3H標(biāo)記，從理論上計算，所得DNA分子中含有3H標(biāo)記的占

 

．
（4）假定DNA片段含200對脫氧核苷酸，經(jīng)3次擴(kuò)增，從理論上計算需要

 

個游離脫氧核苷酸．

Answer 1

考點(diǎn)：PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用,DNA分子的復(fù)制

專題：

分析：PCR技術(shù)的原理是模擬生物體內(nèi)DNA分子復(fù)制的過程，利用DNA分子熱變形原理，通過控制溫度控制控制DNA分子的解聚和結(jié)合，DNA分子體內(nèi)復(fù)制過程DNA的解旋是在解旋酶的作用下實(shí)現(xiàn)的；PCR擴(kuò)增DNA片段過程最高經(jīng)過n次擴(kuò)增，形成的DNA分子數(shù)是2ⁿ個，其中只有2條單鏈不含有引物．

解答： 解：（1）PCR技術(shù)的原理是模擬生物體內(nèi)DNA分子復(fù)制的過程．
（2）PCR擴(kuò)增過程中通過95℃高溫處理，使DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)打開，形成單鏈DNA分子；在生物體內(nèi)DNA分子解旋形成單鏈?zhǔn)窃诮庑�酶的作用下完成的�?br />（3）分析題圖可知，該圖經(jīng)過一次循環(huán)形成了2個DNA分子，如果引物都用³H標(biāo)記，從理論上計算，所得2個DNA分子中含有³H標(biāo)記．
（4）DNA片段含200對脫氧核苷酸，經(jīng)3次擴(kuò)增，形成了8個DNA分子，其中只有兩條DNA單鏈上沒有引物，因此該過程中需要的游離的脫氧核糖核苷酸數(shù)是200×2×（8-1）-14×20=2520個．
故答案為：
（1）DNA復(fù)制  
（2）DNA雙鏈彼此分開
（3）解旋     解旋
（4）100%         2520

點(diǎn)評：對于PCR擴(kuò)增DNA片段和體內(nèi)DNA分子復(fù)制的區(qū)別與聯(lián)系及堿基互補(bǔ)配對原則的理解，把握知識點(diǎn)間的內(nèi)在聯(lián)系是解題的關(guān)鍵．