【題目】某種熒光蛋白(GFP)在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會(huì)發(fā)出綠色熒光,這一特性可用于檢測(cè)細(xì)胞中目的基因的表達(dá)。某科研團(tuán)隊(duì)將某種病毒的外殼蛋白(L1)基因連接在GFP基因的5'末端,獲得了L1-GFP融合基因(簡(jiǎn)稱(chēng)甲),并將其插入質(zhì)粒P0。構(gòu)建了真核表達(dá)載體P1,其部分結(jié)構(gòu)和酶切點(diǎn)的示意圖如下,圖中E1~E4四種限制酶產(chǎn)生的黏性末端各不相同。

回答下列問(wèn)題:

(1)據(jù)圖推斷,該團(tuán)隊(duì)在將甲插入質(zhì)粒P0時(shí),使用了兩種限制酶,這兩種酶是__________。圖中的啟動(dòng)子可作為_______________的結(jié)合位點(diǎn),催動(dòng)轉(zhuǎn)錄的進(jìn)行。

(2)將P1轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的牛皮膚細(xì)胞后,若在該細(xì)胞中觀(guān)察到了_________,則說(shuō)明L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成表達(dá)。基因工程的核心步驟是______________________。

(3)通過(guò)___________的方法將目的基因?qū)肱5?/span>________中,再經(jīng)過(guò)早期胚胎培養(yǎng),胚胎移植等過(guò)程,獲得含有甲的轉(zhuǎn)基因牛。

(4)為了檢測(cè)甲是否存在于克隆牛的不同組織細(xì)胞中,某同學(xué)用PCR方法進(jìn)行鑒定。在鑒定時(shí)應(yīng)分別以該牛不同組織細(xì)胞中的______________ (填"mRNA""總RNA"或"核DNA")作為PCR模板。

【答案】E1和E4 RNA聚合酶 綠色的熒光 基因表達(dá)載體的構(gòu)建 顯微注射 受精卵 核DNA

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟:

1)目的基因的獲取:方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

4)目的基因的檢測(cè)與鑒定:分子水平上的檢測(cè):①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù);②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù);③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定:抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

(1) 使用E1、E4這兩種酶進(jìn)行酶切可以保證目的基因甲的完整性, 圖中的啟動(dòng)子可作為RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn),催化轉(zhuǎn)錄的進(jìn)行。

(2) 在該細(xì)胞中觀(guān)察到了綠色的熒光,說(shuō)明基因已表達(dá),即L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成了轉(zhuǎn)錄和翻譯過(guò)程;蚬こ痰暮诵牟襟E是基因表達(dá)載體的構(gòu)建。

(3)通過(guò)顯微注射的方法將目的基因?qū)肱5氖芫阎,再進(jìn)行體外培養(yǎng)、胚胎移植等相關(guān)操作獲得轉(zhuǎn)基因牛。

(4) 為檢測(cè)L1-GFP融合基因是否存在于克隆牛的不同組織細(xì)胞中,某同學(xué)用PCR方法進(jìn)行鑒定。PCR技術(shù)是體外DNA復(fù)制技術(shù),故在鑒定時(shí)應(yīng)分別以該牛不同組織細(xì)胞中的核DNA作為PCR模板 。

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】能使人生病的細(xì)菌無(wú)處不在,當(dāng)這些細(xì)菌侵入人體后,白細(xì)胞會(huì)發(fā)揮重要的防衛(wèi)功能,下圖表示白細(xì)胞吞噬并消滅細(xì)菌的過(guò)程。請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題:

1)細(xì)菌與白細(xì)胞相比,其結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別是細(xì)菌沒(méi)有__________。白細(xì)胞吞噬細(xì)菌與細(xì)胞膜具有__________的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)有關(guān)

2)白細(xì)胞消滅細(xì)菌與小泡內(nèi)的水解酶有關(guān),水解酶先在[ ]_____上合成,再經(jīng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)加工運(yùn)輸?shù)?/span>[ ]_____再加工,最后由小泡與吞噬泡融合將細(xì)菌分解。上述過(guò)程主要由[ ]_____提供能量。

3)控制水解酶合成的DNA存在于[ ]_____中,這表明該結(jié)構(gòu)具有_____的重要功能。

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】纖維素分解菌培養(yǎng)基的配方,請(qǐng)回答下列問(wèn)題:

(1)實(shí)驗(yàn)用的培養(yǎng)皿常用的兩種火菌方法是____,其中一種方法在滅菌之前需要將鍋內(nèi)的冷空氣排盡,否則會(huì)因____而影響滅菌效果。

(2)這個(gè)培養(yǎng)基通過(guò)__________實(shí)現(xiàn)對(duì)纖維素分解菌的選擇作用,此外在培養(yǎng)過(guò)程中要將培養(yǎng)瓶放置在搖床上,其目的是_____。

(3)據(jù)圖分析,培養(yǎng)基中添加的多種無(wú)機(jī)鹽的作用包括_____(至少答出三點(diǎn))。

(4)若將此培養(yǎng)基改為纖維素分解菌的鑒別培養(yǎng)基,還需要在其中添加的成分有_______。在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物時(shí),常用紫外線(xiàn)對(duì)空氣進(jìn)行消毒,其消毒原理是________。

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】“山丹丹開(kāi)花紅艷艷”,取山丹丹花瓣細(xì)胞分別置于A、B溶液中,細(xì)胞失水量的變化情況如圖甲所示。下列相關(guān)敘述正確的是

A. 甲圖中兩條曲線(xiàn)的差異是由于A、B溶液濃度不同所致

B. 若B溶液的濃度減小,則甲圖曲線(xiàn)中b點(diǎn)左移

C. 甲圖中a點(diǎn)細(xì)胞狀態(tài)對(duì)應(yīng)乙圖中的①

D. b時(shí)刻,B溶液中細(xì)胞的細(xì)胞液濃度等于外界溶液濃度

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】1953年,沃森和克里克共同撰寫(xiě)的論文《核酸的分子結(jié)構(gòu)——脫氧核糖核酸的一個(gè)結(jié)構(gòu)模型》在英國(guó)《自然》雜志上刊載,為解釋DNA的功能奠定了基礎(chǔ),標(biāo)志著分子生物學(xué)的開(kāi)端。如圖是DNA片段的結(jié)構(gòu)圖,圖甲表示DNA片段的平面結(jié)構(gòu),圖乙表示DNA片段的空間結(jié)構(gòu)。請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題:

1)關(guān)于雙鏈DNA結(jié)構(gòu)特點(diǎn)的敘述,錯(cuò)誤的是____

A.兩條鏈反向平行盤(pán)旋成雙螺旋結(jié)構(gòu) B.脫氧核糖和磷酸交替連接形成基本骨架

C.分子中GC堿基對(duì)含量越高結(jié)構(gòu)越穩(wěn)定 D.每個(gè)DNA含有4個(gè)游離的磷酸基團(tuán)

2)含有200個(gè)堿基的某DNA片段中堿基間的氫鍵共有260個(gè)。則該DNA片段中共有腺嘌呤______個(gè),CG構(gòu)成的堿基對(duì)共______對(duì)。

3)已知嘌呤與嘧啶的大小和形狀不同。雙鏈DNA中,A總是與T配對(duì),G總是與C配對(duì),這一特點(diǎn)可能導(dǎo)致DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)具有什么樣的特點(diǎn)?______________________________。

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】人們發(fā)現(xiàn)小型豬的器官可用來(lái)替代人體器官進(jìn)行移植,但小型豬器官表面抗原仍可引起免疫排斥反應(yīng)。下圖為科學(xué)家將小型豬器官表面抗原基因(Anti)“反向處理"(Anti基因的模板鏈和 reanti基因的模板鏈堿基序列互補(bǔ)),并人工合成 reanti基因,轉(zhuǎn)入豬成纖維細(xì)胞,培育成轉(zhuǎn)基因克隆豬的過(guò)程示意圖。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:

(1)若使 reanti基因和Anti基因在轉(zhuǎn)基因克隆豬的同一細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄,應(yīng)在人工合成的reanti基因的首段連接____________________。

(2)圖中轉(zhuǎn)基因克隆豬不含有豬抗原的實(shí)質(zhì)是 reanti基因抑制了Anti基因的______(填“轉(zhuǎn)錄”或“翻譯")。

(3)圖中①、②過(guò)程涉及到的現(xiàn)代生物技術(shù)中,核心步驟是__________。

(4)從豬中取出胎兒成纖維細(xì)胞,用________處理,然后進(jìn)行分散培養(yǎng)。培養(yǎng)時(shí),將培養(yǎng)瓶置于含______________的混合氣體培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

(5)圖中④過(guò)程涉及到的現(xiàn)代生物技術(shù)是________________。

(6)將豬舍與蔬菜大棚相通,可使豬和蔬菜的產(chǎn)量都提高,這種做法主要體現(xiàn)了生態(tài)工程中的_________________原理。

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】生態(tài)浮床技術(shù)在我國(guó)美麗鄉(xiāng)村建設(shè)中,為綠水再現(xiàn)做出了貢獻(xiàn)。生態(tài)浮床技術(shù)是一個(gè)綜合了物理、化學(xué)、生物方法的水環(huán)境原位生態(tài)修復(fù)過(guò)程,它利用水生植物及根系微生物吸收N、P元素,同時(shí)可降解有機(jī)物和重金屬,并以收獲植物體形式將其搬離水體,保護(hù)了水生態(tài)環(huán)境,實(shí)現(xiàn)了景觀(guān)效益和生態(tài)功能的雙贏。下圖為某湖泊應(yīng)用生態(tài)浮床技術(shù)的示意圖,請(qǐng)回答相關(guān)問(wèn)題:

(1)生態(tài)浮床的應(yīng)用使水體中群落的空間更加復(fù)雜,發(fā)生變化的空間結(jié)構(gòu)是_____________,這種變化的意義是_______________________________。

(2)浮床下方水體中藻類(lèi)植物的數(shù)量低于無(wú)浮床的水域,這主要是受____________(環(huán)境因素)的影響,因此,浮床在一定程度上能夠抑制藻類(lèi)的生長(zhǎng)繁殖,防止水華發(fā)生。

(3)請(qǐng)據(jù)圖分析生態(tài)浮床加速水體凈化的原因:_________________________________。(至少說(shuō)出兩點(diǎn))

(4)生態(tài)浮床既能凈化水質(zhì)、防治水華,又能美化環(huán)境,這體現(xiàn)了生物多樣性_________價(jià)值。

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】下列有關(guān)ATP的敘述中,不正確的是( )

A. ATP是細(xì)胞中的直接供能物質(zhì)

B. ATP分子中含有4個(gè)高能磷酸鍵

C. 細(xì)胞呼吸釋放的能量一部分用于形成ATP,一部分以熱能形式散失

D. 葉綠體進(jìn)行光合作用時(shí)既能合成ATP,又能分解ATP

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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:

【題目】關(guān)于高等植物葉綠體中光合色素的敘述,不正確的是( )

A. 提取色素研磨時(shí)加入少許CaCO3,可防止葉綠素被破壞

B. 葉綠體中的色素能夠溶解在無(wú)水乙醇中

C. 利用層析法可分離4種光合色素

D. 植物呈現(xiàn)綠色是由于葉綠素能有效地吸收綠光

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同步練習(xí)冊(cè)答案