化學(xué)降解法是一種傳統(tǒng)的測定DNA分子堿基序列的方法,具體操作過程如下圖:
(1)由待測序的DNA片段獲得DNA單鏈的方法是??????? ,圖中特定化學(xué)試劑的作用是破壞DNA單鏈在某種特定堿基處的?????? 鍵。
(2)電泳時(shí),電泳槽內(nèi)先要加入????????????? ,再將處理好的不同長度的DNA片段樣品加入點(diǎn)樣孔,利用待分離樣品中各分子的帶電性質(zhì),以及分子__???????? __、形狀的不同,使它們在電場作用下產(chǎn)生不同的???????? ,從而實(shí)現(xiàn)樣品中各分子的分離和鑒定。
(3)從理論上分析,要想測出圖中該DNA片段的全部堿基序列,按以上模式操作至少???????? 次。
(4)若想進(jìn)一步判定該DNA片段中是否含有某基因,可用基因探針檢測。探針的制備是取某基因的???????? 條鏈,并作 ??????????? 。
⑴用解旋酶(或95℃高溫)處理待測DNA片段???? 磷酸二酯 ⑵緩沖液?????? (本身)大小???? 遷移速度?? ⑶ 3 ⑷一???? 放射性同位素標(biāo)記
【解析】
試題分析:(1)用DNA解旋酶或高溫處理能將DNA解旋獲得DNA單鏈。圖中特定化學(xué)試劑的作用是切割DNA單鏈,獲得DNA判斷,是作用于DNA骨架的磷酸和脫氧核糖之間的磷酸二酯鍵。
(2)電泳時(shí),電泳槽內(nèi)先要加入緩沖液。利用待分離樣品中各分子的帶電性質(zhì),以及分子(本身)大小、形狀的不同,使它們在電場作用下產(chǎn)生不同的遷移速度,實(shí)現(xiàn)樣品中各分子的分離和鑒定。
(3)按照圖示方式1次可以測定1種堿基排序,3次可以測定3種堿基排序,前面3種堿基排序確定,第4種堿基排序也隨之確定,故至少需要操作3次。
(4)基因探針是取某基因的1條鏈,用放射性同位素標(biāo)記或熒光標(biāo)記。
考點(diǎn):本題考查化學(xué)降解法相關(guān)知識,意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點(diǎn),把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系,形成知識的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)能力。
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科目:高中生物 來源: 題型:單選題
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科目:高中生物 來源: 題型:
化學(xué)降解法是一種傳統(tǒng)的測定DNA堿基序列的方法。特定化學(xué)試劑的處理能使DNA單鏈在某種特定堿基處斷開,且每條鏈只在一處斷開;利用凝膠電泳可將不同長度的DNA片段彼此分離,通過放射自顯影可使帶標(biāo)記的DNA片段在X光底片上顯現(xiàn)出相應(yīng)譜帶。下圖為測定已標(biāo)記后的DNA片段中胞嘧啶位置的過程示意圖。下列敘述正確的是
A.使用特定化學(xué)試劑的作用是破壞堿基之間的氫鍵
B.此過程需解旋酶、限制性核酸內(nèi)切酶和DNA聚合酶的參與
C.測定此DNA片段中鳥嘌呤位置時(shí),X光底片上會顯現(xiàn)2種不同長度的譜帶
D.從理論上分析,按圖中模式操作兩次即可測定出DNA片段的全部堿基順序
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