Question

【題目】多氯聯(lián)苯是一種對人體有很大危害的有機(jī)物質(zhì)，污染土壤后，很難清除。研究發(fā)現(xiàn)，部分酵母菌具有分解多氯聯(lián)苯的作用。為消除這種污染，科研人員計劃從被污染的土壤中篩選出高效分解多氯聯(lián)苯的菌株。請回答問題：

（1）篩選分解多氯聯(lián)苯的菌株時，應(yīng)將土壤樣品溶解稀釋，接種到以_____為唯一碳源的培養(yǎng)基上。

菌落數(shù) 平板編號稀釋倍數(shù)	1	2	3
10	420	495	393
100	45	57	51
1000	2	7	3

（2）對初步提取到的菌株要進(jìn)行_____培養(yǎng)，一般接種操作方法有兩種，其中之一是下圖所示的_____法。

（3）將酵母菌溶液分別稀釋 10 倍、100 倍、1000 倍。每個濃度都接種三個平板，每個平板均用_________接入 0．1mL 稀釋菌液，該接種方法是_____。培養(yǎng)時，需將培養(yǎng)皿_____培養(yǎng)，以防冷凝水造成污染。經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，平板上的菌落如上表所示：據(jù)此可得出，每升菌液中酵母菌活菌數(shù)為_____個。

（4）若要長期保存提純得到的菌種，可以采用_____的方法。

Answer 1

【答案】多氯聯(lián)苯 純化 平板劃線 移液槍 稀釋涂布平板法 倒置 5.1×107 甘油管藏

【解析】

微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)溶化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

（1）篩選分解多氯聯(lián)苯的菌株時，應(yīng)將土壤樣品稀釋，接種到以多氯聯(lián)苯為唯一碳源的培養(yǎng)基上，只有能分解多氯聯(lián)苯的菌株才能在這樣的培養(yǎng)基中生存。

（2）對初步提取到的菌株要進(jìn)行純化培養(yǎng)，一般操作方法有兩種，即平板劃線法和稀釋涂布平板法，圖示是利用平板劃線法進(jìn)行微生物接種，把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。

（3）每個平板用移液槍接入0.1mL稀釋菌液，該接種方法是稀釋涂布平板法。培養(yǎng)時，為避免培養(yǎng)基中的水分蒸發(fā)形成水滴到培養(yǎng)基而造成污染，所以需將培養(yǎng)皿倒置。對菌落進(jìn)行計數(shù)時，一般選擇菌落數(shù)在30~300的進(jìn)行記數(shù)，求其平均值，因此選擇稀釋100倍的三個培養(yǎng)基進(jìn)行計算，每升溶液中酵母菌活菌數(shù)=（45+57+51）÷3÷0.1×100×1000=5.1×107個/L。

（4）若要長期保存提純得到的菌種，可以采用甘油管藏的方法。