Question

【題目】釀酒廠常用酸性脲酶去除酒精類飲品中的尿素，以改善酒精類飲品的品質(zhì)。請回答下列問題：

（1）從土壤中篩選酸性脲酶生產(chǎn)菌，其培養(yǎng)基的主要成分有葡萄糖、尿素、瓊脂等，從功能上分析，該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基的氮源來自_________。

（2）篩選和純化酸性脲酶生產(chǎn)菌常用的兩種接種方法是___________和_____________。配制濃度梯度為10-1的系列稀釋液時，需用移液管將lmL菌液移入盛有____mL蒸餾水的試管中。

（3）對同一濃度的酸性脲酶生產(chǎn)菌稀釋液，分別用血球計數(shù)板計數(shù)和稀釋涂布平板法計數(shù)，若不存在實驗誤操作，則前者的數(shù)量_______（多于／等于／小于）后者，其原因是________________________。

（4）若用海藻酸鈉固定含酸性脲酶的細(xì)菌時，應(yīng)將海藻酸鈉溶液和細(xì)胞混合滴入溶液中。下表是不同濃度海藻酸鈉形成的凝膠珠狀況，從表中看出，海藻酸鈉的濃度應(yīng)選用__________g／dL。若利用固定化酶技術(shù)，它的優(yōu)點是___________________。

海藻酸鈉質(zhì)量濃度（g/dL）	凝膠強度	凝膠氣泡量	成球難度	凝珠形狀
1.0	中	沒有	較易	扁圓形
2.0	中	少量	易	圓球形
3.0	強	較多	稍難	有托尾
4.0	強	大量	難	難成球形

Answer 1

【答案】選擇 尿素 平板劃線法 稀釋涂布平板法 9 多于 有些菌落連接在一起，計數(shù)偏小 2.0 可重復(fù)利用，且利于產(chǎn)物的純化

【解析】

1、培養(yǎng)基按功能分：

2、從土壤中篩選酸性脲酶生產(chǎn)菌，要使用以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，碳源應(yīng)該使用葡萄糖。
3、在固體培養(yǎng)基上接種常用的方法主要有稀釋涂布平板法和平板劃線法，使用稀釋涂布平板法進(jìn)行微生物計數(shù)時，結(jié)果可能會偏小。

（1）培養(yǎng)基的主要成分有葡萄糖、尿素、瓊脂等，其中尿素是唯一的氮源，因此從功能上分析，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。
（2）在固體培養(yǎng)基上接種常用的方法主要有稀釋涂布平板法和平板劃線法。配制濃度梯度為10-1的系列稀釋液時，需用移液管將lmL菌液移入盛有9mL蒸餾水的試管中。

（3）使用稀釋涂布平板法進(jìn)行微生物計數(shù)時，由于有些菌落連接在一起統(tǒng)計成了一個菌落，故計數(shù)的結(jié)果可能會偏小。而血球計數(shù)板計數(shù)可能會將死的菌體計數(shù)在內(nèi)，因此，分別用血球計數(shù)板計數(shù)和稀釋涂布平板法計數(shù)，若不存在實驗誤操作，則前者的數(shù)量多于后者。

（4）分析在不同濃度海藻酸鈉條件下形成的凝膠珠狀況，海藻酸鈉質(zhì)量濃度為2.0g/dL時，凝膠氣泡量較少，凝膠球為橢圓形且容易成球，即用海藻酸鈉固定酵母菌R時海藻酸鈉的濃度應(yīng)選用2.0g/dL；利用固定化細(xì)胞技術(shù)可使被固定的細(xì)胞重復(fù)利用，且利于產(chǎn)物的純化。