Question

多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)�？捎糜谶z傳疾病的診斷、刑偵破案、古生物學(xué)、基因克隆和DNA序列測定等方面�；卮鹨韵聠栴}:

(1)細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制過程中,引物的作用是 ,而且DNA復(fù)制的前提是 。

(2)PCR利用了 原理,可通過控制溫度來控制雙鏈的解旋與結(jié)合。

(3)PCR技術(shù)用到的酶是 ,與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制時(shí)發(fā)揮相同作用的酶相比區(qū)別在于 。

(4)下面表格是DNA體內(nèi)復(fù)制與PCR反應(yīng)的部分比較結(jié)果。通過比較分析,請推導(dǎo)出PCR反應(yīng)合成DNA子鏈時(shí)能量來源于 。

	原料	ATP
DNA體內(nèi)復(fù)制	四種脫氧核苷酸	需要
PCR反應(yīng)	脫氧胞苷三磷酸、脫氧腺苷三磷酸 脫氧胸苷三磷酸、脫氧鳥苷三磷酸	不需要

(5)假如PCR反應(yīng)所用的引物含有放射性、模板不具有放射性,且引物不被切除,則經(jīng)過n次循環(huán),具有放射性的脫氧核苷酸鏈占總鏈數(shù)的比值為 。

 

Answer 1

(1)使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸 解開雙鏈(或打開氫鍵)

(2)DNA的熱變性

(3)Taq DNA聚合酶 耐高溫

(4)所用原料水解產(chǎn)生相應(yīng)脫氧核苷酸時(shí)所釋放的能量

(5)

【解析】(1)DNA具有雙螺旋結(jié)構(gòu),復(fù)制時(shí)遵循堿基互補(bǔ)配對原則,所以打開氫鍵,DNA聚合酶方可在引物的引導(dǎo)下從引物3'端開始連接脫氧核苷酸。(2)PCR技術(shù)就是模擬細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制的一項(xiàng)技術(shù),只不過該技術(shù)中雙鏈的解旋與結(jié)合是通過溫度來控制的,原因在于DNA具有熱變性。(3)Taq DNA聚合酶具有耐高溫的特性。(4)DNA無論是體內(nèi)復(fù)制還是體外復(fù)制,子鏈合成過程中都要消耗能量,而PCR反應(yīng)不加入ATP供能,且加入的原料也不是四種脫氧核苷酸,可見PCR所用原料在水解成相應(yīng)脫氧核苷酸時(shí),能釋放出等同于ATP水解的能量。(5)DNA復(fù)制n次產(chǎn)生2n個(gè)DNA,共有2n+1條脫氧核苷酸鏈,由于母鏈不具有放射性,所以具有放射性的脫氧核苷酸鏈占總鏈數(shù)的比值為=。