Question

回答下列有關(guān)基因表達(dá)和基因工程問(wèn)題
人組織纖溶酶原激活物（htPA）是一種重要的藥用蛋白，可在轉(zhuǎn)htPA基因奶牛的乳汁中獲得．圖1表示利用奶牛乳汁生產(chǎn)人組織纖溶酶原激活物的培育過(guò)程：
（1）在形成圖中③的過(guò)程中，獲�、诘耐緩街饕�有

 

，②進(jìn)入③需要

 

的協(xié)助．
（2）為了在該奶牛乳汁中獲得htPA必須將htPA基因連接在

 

A．乳腺蛋白基因的轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)之后    B．乳腺蛋白基因的轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)之前
C．起始密碼子編碼序列之后           D．乳腺蛋白基因的轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)之后
（3）培養(yǎng)從③到④的過(guò)程中一般用未受精的去核卵細(xì)胞為受體，不用普通的體細(xì)胞的原因是

 

．
（4）⑦與⑥的遺傳性狀不一樣的理由是

 

．
（5）圖2為質(zhì)粒限制酶酶切圖譜．htPA基因不含圖中限制酶識(shí)別序列．為使PCR擴(kuò)增的htPA基因重組進(jìn)該質(zhì)粒，擴(kuò)增的htPA基因兩端可分別引入

 

和不同限制酶的識(shí)別序列．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專(zhuān)題：

分析：1、分析題圖：①～③是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程，需要先用胰蛋白酶將細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞；②是目的基因（血清白蛋白基因）；②～③表示采用轉(zhuǎn)基因技術(shù)，將目的基因（血清白蛋白基因）導(dǎo)入受體細(xì)胞的過(guò)程；④是囊胚；④～⑤采用了胚胎分割技術(shù)，對(duì)囊胚進(jìn)行胚胎分割時(shí)，要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割；⑤～⑥表示胚胎移植過(guò)程；⑦是轉(zhuǎn)基因生物（乳腺生物反應(yīng)器）．
2、基因表達(dá)載體的組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因．啟動(dòng)子是RNA聚合酶特異性識(shí)別和結(jié)合的DNA序列，是基因的一個(gè)組成部分，控制基因表達(dá)（轉(zhuǎn)錄）的起始時(shí)間和表達(dá)的程度．終止子是給予RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)的DNA序列．

解答： 解：（1）在形成圖中③的過(guò)程中，獲�、诘耐緩街饕�有從體細(xì)胞中分離和化學(xué)方法人工合成，②進(jìn)入③需要運(yùn)載體的協(xié)助．
（2）為了在該奶牛乳汁中獲得htPA必須將htPA基因連接在A乳腺蛋白基因的轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)之后．
（3）培養(yǎng)從③到④的過(guò)程中一般用未受精的去核卵細(xì)胞為受體，不用普通的體細(xì)胞的原因是卵細(xì)胞大容易操作，表達(dá)全能性高．
（4））⑦與⑥的遺傳性狀不一樣的理由是因?yàn)閭�(gè)體⑦的遺傳信息幾乎全部來(lái)自供體的細(xì)胞核．
（5）根據(jù)啟動(dòng)子和終止子的生理作用可知，目的基因應(yīng)導(dǎo)入啟動(dòng)子和終止子之間．圖中看出，兩者之間存在于三種限制酶切點(diǎn)，但是由于Xbal在質(zhì)粒不止一個(gè)酶切位點(diǎn)，因此為使PCR擴(kuò)增的bglB基因重組進(jìn)該質(zhì)粒，擴(kuò)增的bglB基因兩端需分別引入NdeⅠ和BamHⅠ不同限制酶的識(shí)別序列．
故答案為：
（1）從體細(xì)胞中分離和化學(xué)方法人工合成運(yùn)載體
（2）A
（3）卵細(xì)胞大容易操作，表達(dá)全能性高
（4）因?yàn)閭�(gè)體⑦的遺傳信息幾乎全部來(lái)自供體的細(xì)胞核
（5）NdeⅠBamHⅠ

點(diǎn)評(píng)：本題綜合考查基因工程、動(dòng)物體細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植、胚胎分割等技術(shù)，意在考查考生的識(shí)圖能力和分析理解能力；能理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系的能力，難度適中．