Question

12．煙草是種植廣泛的經(jīng)濟(jì)作物，由于相關(guān)病毒的感染會(huì)導(dǎo)致大量減產(chǎn)．煙草花葉病毒（TMV）主要由蛋白質(zhì)外殼和RNA組成，這種病毒感染煙草時(shí)能引起花葉病，在煙葉上出現(xiàn)病斑．
研究人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗TMV的煙草，主要流程如圖所示．請(qǐng)分析并回答：

圖中過(guò)程①表示反轉(zhuǎn)錄，經(jīng)過(guò)程②獲得的目的基因兩側(cè)除應(yīng)含有相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)外，目的基因的兩端還必須有啟動(dòng)子和終止子．由圖分析，構(gòu)建的重組質(zhì)粒上含有的標(biāo)記基因是卡那霉素抗性基因．過(guò)程⑤采用的是植物組織培養(yǎng)技術(shù)，培養(yǎng)基中除含有卡那霉素及植物必需的各種營(yíng)養(yǎng)成分外，還必須添加植物激素，以保證受體細(xì)胞能經(jīng)培養(yǎng)再生成植株．過(guò)程⑥可采取抗原-抗體雜交的方法，檢測(cè)植株是否合成了相關(guān)蛋白．在個(gè)體水平的鑒定過(guò)程中，可通過(guò)接種煙草花葉病毒的方法來(lái)確定植株是否具有抗性．

Answer 1

分析 本題是對(duì)通過(guò)基因工程獲得抗煙草花葉病毒植株的考查，回憶教材中分析通過(guò)基因工程培育抗TMV的煙草的流程．
分析題圖：圖中①是由RNA形成DNA的過(guò)程，是逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程，目的基因獲得后需要用限制性內(nèi)切酶切割，獲得粘性末端，基因要表達(dá)還必須有啟動(dòng)子和終止子，因此經(jīng)過(guò)程②獲得的目的基因兩側(cè)應(yīng)含有限制酶的切割位點(diǎn)、啟動(dòng)子和終止子；過(guò)程③構(gòu)建了重組質(zhì)粒；過(guò)程④將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞；過(guò)程⑤受體細(xì)胞放在含有卡那霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，過(guò)程⑤采用的是植物組織培養(yǎng)；培養(yǎng)基中除含有卡那霉素及植物必需的各種營(yíng)養(yǎng)成分外，還必須添加植物激素；過(guò)程⑥獲得轉(zhuǎn)基因植物要進(jìn)行檢測(cè)，分子水平上檢測(cè)植株是否合成了相關(guān)蛋白，可以用抗原-抗體雜交的方法進(jìn)行檢測(cè)；個(gè)體水平上可以用煙草花葉病毒感染該植株，看該植株對(duì)煙草花葉病毒是否具有抗性．梳理基因工程的過(guò)程解答．

解答 解：分析題圖可知，本題是通過(guò)基因工程培育抗TMV的煙草的流程，圖中①是由RNA形成DNA的過(guò)程，是逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程；目的基因獲得后需要用限制性內(nèi)切酶切割，獲得粘性末端；基因要表達(dá)還必須有啟動(dòng)子和終止子，因此經(jīng)過(guò)程②獲得的目的基因兩側(cè)應(yīng)含有限制酶的切割位點(diǎn)、啟動(dòng)子和終止子；由圖分析，受體細(xì)胞放在含有卡那霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，說(shuō)明構(gòu)建的重組質(zhì)粒上含有的標(biāo)記基因是卡那霉素抗性基因；過(guò)程⑤采用的是植物組織培養(yǎng)；培養(yǎng)基中除含有卡那霉素及植物必需的各種營(yíng)養(yǎng)成分外，還必須添加植物激素；分子水平上檢測(cè)植株是否合成了相關(guān)蛋白，可以用抗原-抗體雜交的方法進(jìn)行檢測(cè)；個(gè)體水平上可以用煙草花葉病毒感染該植株，看該植株對(duì)煙草花葉病毒是否具有抗性．
故答案應(yīng)為：
反轉(zhuǎn)錄    限制酶   啟動(dòng)子和終止子  卡那霉素抗性
植物組織培養(yǎng)         植物激素
抗原-抗體雜交     接種煙草花葉病毒

點(diǎn)評(píng) 本題的知識(shí)點(diǎn)是基因工程的過(guò)程，對(duì)于相關(guān)知識(shí)的記憶是解題的關(guān)鍵．