Question

現(xiàn)有甲、乙兩種可能有一定毒性的化學(xué)物質(zhì)，實(shí)驗(yàn)室研究人員欲通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法來(lái)鑒定它們是否有毒性，并比較二者毒性的強(qiáng)弱。請(qǐng)你以一個(gè)研究人員的身份參與此項(xiàng)研究，完成下列實(shí)驗(yàn)報(bào)告并回答有關(guān)問(wèn)題。

Ⅰ.實(shí)驗(yàn)原理：                                                              。

根據(jù)這種變異細(xì)胞占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)（以下稱Q值），可判斷該化學(xué)物質(zhì)的毒性。

Ⅱ.實(shí)驗(yàn)材料：活的小白鼠胚胎。

Ⅲ.藥品用具：胰蛋白酶液、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液、動(dòng)物細(xì)胞固定液、適宜濃度的龍膽紫溶液、滴管、培養(yǎng)皿、剪刀、錐形瓶、培養(yǎng)瓶、恒溫箱、載玻片、蓋玻片、顯微鏡

Ⅳ.實(shí)驗(yàn)步驟

（1）制備細(xì)胞懸浮液

把活的小白鼠胚胎放在培養(yǎng)皿中剪碎，轉(zhuǎn)入錐形瓶中，加入胰蛋白酶液處理，使胚胎組織離散成單個(gè)細(xì)胞，再加入動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液，制成細(xì)胞懸浮液。

（2）進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)

①取A、B、C三個(gè)潔凈的培養(yǎng)瓶，                                             。

②向A培養(yǎng)瓶中加入化學(xué)物質(zhì)甲，向B培養(yǎng)瓶中加入等量的化學(xué)物質(zhì)乙，并將培養(yǎng)瓶搖勻。

③向C瓶?jī)?nèi)                                                                 。

（3）制作臨時(shí)裝片

①當(dāng)細(xì)胞增殖到大約第8代左右時(shí)，同時(shí)從恒溫箱中取出三個(gè)培養(yǎng)瓶，用胰蛋白酶液處理，使培養(yǎng)的細(xì)胞從瓶壁上脫落，再加入動(dòng)物細(xì)胞固定液以便迅速殺死細(xì)胞并固定細(xì)胞。

②靜置一段時(shí)間后，分別從各培養(yǎng)瓶底部吸取適量的細(xì)胞懸浮液，滴在與培養(yǎng)瓶有相同編號(hào)的載玻片的中央，      ，3~5 min后，蓋上蓋玻片。

（4）鏡檢和統(tǒng)計(jì)

把臨時(shí)裝片放在顯微鏡下，先用低倍鏡后用高倍鏡，尋找處于          期的細(xì)胞，并與

        對(duì)比以確認(rèn)發(fā)生變異的細(xì)胞，同時(shí)統(tǒng)計(jì)該期變異的細(xì)胞占該期細(xì)胞總數(shù)的百分?jǐn)?shù)（Q值）。

Ⅴ.結(jié)果與結(jié)論

經(jīng)研究人員實(shí)驗(yàn)得知：A、B、C三個(gè)培養(yǎng)瓶的Q值依次為：Q_A=1.3%、Q_B=12.5%、Q_C=0.1%，由此可知該實(shí)驗(yàn)的結(jié)論是                                                       。

Ⅵ.回答問(wèn)題

在實(shí)驗(yàn)中，C培養(yǎng)瓶起什么作用？               。

Answer 1

Ⅰ.有毒物質(zhì)能誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生變異

Ⅳ.（2）①消毒滅菌，加入等量的細(xì)胞懸浮液

③加入等量生理鹽水，并搖勻。

（3）②用適宜濃度龍膽紫溶液染色

（4）細(xì)胞有絲分裂中  C組

Ⅴ.甲、乙都是有毒性的，且乙的毒性大于甲

Ⅵ.對(duì)照

解析:

本題主要是通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)考查實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。有毒物質(zhì)會(huì)引起細(xì)胞染色體的變異，在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入待測(cè)物質(zhì)，通過(guò)觀察細(xì)胞是否發(fā)生變異以及變異細(xì)胞的數(shù)量來(lái)檢測(cè)待測(cè)物質(zhì)是否有毒。設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)需要遵循單一變量原則、等量原則和對(duì)照原則，同時(shí)需要對(duì)題干內(nèi)容前后聯(lián)系來(lái)看，根據(jù)研究人員的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知A組和B組為實(shí)驗(yàn)組，C為對(duì)照組，并不是任意設(shè)置的；首先應(yīng)向三組加入等量的已制備的細(xì)胞懸浮液；設(shè)置對(duì)照時(shí)應(yīng)向C組加入等量的生理鹽水；鑒定是否發(fā)生染色體變異時(shí)需要通過(guò)顯微鏡來(lái)鏡檢，需要制作裝片同時(shí)要對(duì)染色體進(jìn)行龍膽紫染色；觀察染色體的最佳時(shí)期是有絲分裂的分裂中期。