Question

11．血清白蛋白可用于治療組織水腫、抗血小板凝集等疾病，科學(xué)家利用基因工程技術(shù)成功培育出了轉(zhuǎn)基因羊，從其分泌的乳汁中可提取血清白蛋白．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）目前獲得目的基因常用方法之一是從基因文庫(kù)中獲取，進(jìn)而用PCR技術(shù)擴(kuò)增，此技術(shù)應(yīng)滿足的條件有：適宜的溫度和PH、原料、模板、能量、引物、熱穩(wěn)定DNA聚合（Taq）酶．
（2）將血清白蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子 等調(diào)控組件重組在一起，構(gòu)建基因表達(dá)載體，該過(guò)程需要用限制酶和DNA連接酶，然后通過(guò)顯微注射技術(shù)，導(dǎo)入羊的受精卵中．通過(guò)早期胚胎培養(yǎng)發(fā)育成桑椹胚或囊胚后移植到受體母羊子宮內(nèi)，最終獲得分泌的乳汁中含有血清白蛋白的乳腺生物反應(yīng)器．
（3）可利用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)基因羊的乳汁中是否含有血清白蛋白．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）目前獲得目的基因常用方法之一是從基因文庫(kù)中獲取，進(jìn)而用PCR技術(shù)擴(kuò)增；PCR技術(shù)擴(kuò)增的條件有：適宜的溫度和pH、原料、模板、能量、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合（Taq）酶．
（2）基因表達(dá)載體的組成包括啟動(dòng)子、終止子、目的基因和表達(dá)基因，因此構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，要將目的基因（血清白蛋白基因）與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起；構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，首先要用限制酶切割外源DNA分子和運(yùn)載體，其次要用DNA連接酶將目的基因與運(yùn)載體連接在一起；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法．
（3）檢測(cè)目的基因是否表達(dá)形成相應(yīng)的蛋白質(zhì)可利用抗原抗體雜交技術(shù)．
故答案為：
（1）基因文庫(kù)  PCR引物（若添加擴(kuò)增緩沖液算對(duì)）  熱穩(wěn)定 DNA 聚合（Taq）
（2）啟動(dòng)子     限制酶和DNA連接      顯微注射
（3）抗原-抗體雜交

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．