Question

【題目】下圖為蘭州環(huán)保部門對流經(jīng)我市黃河中段水域大腸桿菌進(jìn)行檢測的操作和配方圖。據(jù)圖回答下列相關(guān)問題：

（1）圖甲中濾膜的孔徑應(yīng)_____（填“大于”或“小于”）大腸桿菌，該計(jì)數(shù)方法的名稱是_________。

（2）配制圖乙中的基礎(chǔ)培養(yǎng)基時(shí)，除了水分、無機(jī)鹽和瓊脂以外，還應(yīng)加入__________。待各成分都熔化后,調(diào)整pH和滅菌，待冷卻至50℃左右時(shí)，在酒精燈火焰附近___________。大腸桿菌在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上生長呈黑色菌落，從功能上劃分，該培養(yǎng)基屬于_________培養(yǎng)基。

（3）用平板劃線法分離樣液中的大腸桿菌，操作時(shí)，接種環(huán)通過灼燒滅菌，在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線的目的是_________。

（4）要檢測樣液中的大腸桿菌含量，取1ml河水樣本，加入9ml無菌水，充分混勻后，在5個(gè)平板上用涂布平板法分別接入0.1ml樣液，在37℃的培養(yǎng)箱中放置48小時(shí)，5個(gè)平板上的黑色菌落數(shù)分別為5、51、50、49、102。據(jù)此可得出1ml河水樣本中活菌數(shù)為____個(gè)。

Answer 1

【答案】 小于 濾膜法 氮源（蛋白胨） 倒平板 鑒別 將聚集的菌體逐步稀釋，以便獲得單個(gè)菌落 5×103（或5000）

【解析】試題分析：熟記并理解微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)、微生物的分離與計(jì)數(shù)的相關(guān)基礎(chǔ)知識、形成清晰的知識網(wǎng)絡(luò)。在此基礎(chǔ)上從題圖中提取信息并結(jié)合題意作答。

(1)圖甲操作的目的是用濾膜過濾待測水樣，以獲得大腸桿菌，因此濾膜的孔徑應(yīng)小于大腸桿菌，該計(jì)數(shù)方法的名稱是濾膜法。

(2)各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、無機(jī)鹽、碳源、氮源。圖乙中的乳糖可為微生物的生長提供碳源，據(jù)此可知：在配制圖乙中的基礎(chǔ)培養(yǎng)基時(shí)，除了水分、無機(jī)鹽和瓊脂以外，還應(yīng)加入氮源。為了避免雜菌污染，倒平板時(shí)，應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行操作。伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上生長的大腸桿菌菌落呈現(xiàn)黑色，從功能上劃分，該培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基。

(3) 用平板劃線法分離樣液中的大腸桿菌的操作時(shí)，在第二次及以后劃線時(shí)，總是從上一次劃線的末端開始劃線的目的是：將聚集的菌體逐步稀釋，以便獲得單個(gè)菌落。

(4) 由題意可知：將10倍的稀釋液分別涂布到5個(gè)平板上培養(yǎng)，每個(gè)平板均接種了0.1mL樣液，在37℃的培養(yǎng)箱中放置48小時(shí)，5個(gè)平板上的黑色菌落數(shù)分別為5、51、50、49、102。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目時(shí)，應(yīng)將菌落數(shù)明顯最少和最大的舍棄，所以0.1mL稀釋液中平均有(51＋50＋49)÷3＝50個(gè)活菌，每毫升稀釋液中活菌的數(shù)目為50÷0.1＝500，則1ml河水樣本中活菌數(shù)為500×10＝5000＝5×103個(gè)。