Question

【題目】科研人員利用精子作為載體，將人胰島素基因（hINS）轉入綿羊體內(nèi)（圖中BLG是羊的乳腺蛋白基因），以獲得動物乳腺生物反應器，使羊的乳汁中含有人胰島素。其技術流程如下：

請回答下列相關問題：

（1）構建的BLG-hINS重組質粒中目的基因的首端是________________，將重組質粒導入精子中的方法是_________________。

（2）給供體母羊注射促性腺激素，目的是使其________。在體外受精前，要對精子進行_______處理。在胚胎移植過程中，受體選擇好后要用激素進行_________處理，其目的是_________，以保證移植的胚胎能夠繼續(xù)正常發(fā)育。

（3）為獲得轉基因母羊，在進行移植前，還需取滋養(yǎng)層細胞進行___________。將早期胚胎移植至代孕母羊體內(nèi)時，不宜選擇_________（填“原腸胚”、“桑椹胚”或“囊胚”）時期的胚胎。

（4）欲增加圖中早期胚胎的數(shù)量，可通過胚胎工程中的___________技術來實現(xiàn)，在對囊胚進行操作時應注意________________________。

Answer 1

【答案】乳腺蛋白基因啟動子顯微注射技術超數(shù)排卵獲能同期發(fā)情使受體和供體有相同的生理狀態(tài)（生理環(huán)境）（DNA分析）性別鑒定原腸胚胚胎分割將內(nèi)細胞團均等分割

【解析】

解答本題需要掌握以下知識點：1、將目的基因導入不同的受體細胞所采用的方法不同。導入植物細胞：農(nóng)桿菌轉化法（轉基因抗蟲棉用的是花粉管通道法）；導入動物細胞：顯微注射技術（注射入受精卵中）；導入原核生物：一般是將細菌用氯化鈣處理，以增大細菌細胞壁的通透性，使含有目的基因的重組質粒進入受體細胞。體外受精主要包括：卵母細胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精；2、胚胎移植的基本程序主要包括：；①對供、受體的選擇和處理。選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質和正常繁殖能力的受體，供體和受體是同一物種。并用激素進行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理。②配種或人工授精。③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存。配種或輸精后第7天，用特制的沖卵裝置，把供體母牛子宮內(nèi)的胚胎沖洗出來（也叫沖卵）。對胚胎進行質量檢查，此時的胚胎應發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段。直接向受體移植或放入-196℃的液氮中保存。④對胚胎進行移植。⑤移植后的檢查。對受體母牛進行是否妊娠的檢查。3、動物早期胚胎培養(yǎng)，培養(yǎng)液的成分無機鹽、有機鹽類、維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分以及動物血清等。

（1）重組質粒除了含有目的基因以外，還必須有啟動子、終止子及標記基因，其中乳腺蛋白基因啟動子位于目的基因的首端，將目的基因導入不同受體細胞有不同的方法，將重組質粒導入精子（動物細胞）中的方法是顯微注射技術。

（2）對供體母羊注射促性腺激素可促使其超數(shù)排卵。采集的精子需要經(jīng)過獲能處理才具備受精能力。在胚胎移植過程中，用激素對供受體進行同期發(fā)情處理的目的是使供、受體的生理狀態(tài)相同，以保證移植的胚胎能夠繼續(xù)正常發(fā)育。

（3）只有母羊能分泌乳汁，為了獲得母羊，移植前需對已成功轉入目的基因的胚胎進行性別鑒定，以選擇母羊的胚胎進行移植，取滋養(yǎng)層細胞進行（DNA分析）性別鑒定不會影響胚胎正常發(fā)育。胚胎移植時，因為原腸胚時期的細胞已經(jīng)分化為三個胚層且已經(jīng)開始與母體建立生理與組織上的聯(lián)系，因此一般選用桑椹胚或囊胚進行胚胎移植，而不能選用原腸胚。

（4）胚胎分割是指借助顯微操作技術或徒手操作方法切割早期胚胎成二、四等多等份再移植給受體母畜，從而獲得同卵雙胎或多胎的生物學新技術。欲增加圖中早期胚胎的數(shù)量，可通過胚胎工程中的胚胎分割技術來實現(xiàn)，囊胚階段的內(nèi)細胞團將來發(fā)育成胎兒的各種組織，如果分割不均勻，會影響著分割的胚胎發(fā)育，因此在對囊胚進行操作時應注意將內(nèi)細胞團均等分割。