Question

（15分）Ⅰ.土壤農(nóng)桿菌能將自身Ti質(zhì)粒的T-DNA整合到植物染色體DNA上，誘發(fā)植物形成腫瘤。T-DNA中含有植物生長素合成酶基因（S）和細胞分裂素合成酶基因（R）,如圖1所示，它們的表達與否能影響相應植物激素的含量，進而調(diào)節(jié)腫瘤組織的生長與分化�；�因工程常用Ti質(zhì)粒作為運載體，圖2表示抗蟲棉培育中使用的三種限制酶A、B、C的識別序列以及Ti質(zhì)粒上限制酶切割位點的分布，抗蟲基因內(nèi)部不含切割位點，兩側(cè)標明序列為切割區(qū)域。

（1）據(jù)圖2分析，切取抗蟲基因時，使用限制酶 ，切割Ti質(zhì)粒時，使用限制酶 。

（2）成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒含有限制酶A的識別位點 個，若用酶C處理該重組質(zhì)粒，將得到 個DNA片段。

（3）若抗蟲基因插入的位置在R基因內(nèi)部，篩選出 植株即是成功導入抗蟲基因的棉花植株。

Ⅱ.單克隆抗體技術(shù)在生物工程中占有重要地位。請回答相關(guān)問題：

（4）科學家米爾斯坦和柯勒提出單克隆抗體制備技術(shù)的實驗方案：把一種 細胞與能在體外大量增殖的 細胞進行誘導融合，使融合細胞既能大量增殖，又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體。

（5）在技術(shù)操作中，需要將融合細胞用 培養(yǎng)基進行篩選，并進行克隆化培養(yǎng)和 檢測，以得到足夠數(shù)量的符合要求的 （填“單”、“雙”、“多”）核雜交瘤細胞。

（6）若將雜交瘤細胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，可從 中提取出大量的單克隆抗體。

（7）研究人員應用 ，改造了鼠源性抗體分子的結(jié)構(gòu)，降低了鼠源性抗體的人體反應。

Answer 1

Ⅰ.（1）酶B和酶C 酶A和酶B （2）0（2分） 2（2分） （3）生根瘤

Ⅱ.（4）B淋巴 骨髓瘤 （5）特定的選擇（不答“選擇”不給分） 抗體檢測 單

（6）（細胞）培養(yǎng)液 （7）蛋白質(zhì)工程

【解析】

試題分析：

（1）分析圖2可知，在目的基因的左側(cè)只有B酶的識別位點，右側(cè)只有C酶的識別位點；質(zhì)粒上有A、B、C三種限制酶的識別位點，其中T-DNA上含有酶A和酶B的識別位點，所以切取抗蟲基因時，使用限制酶B和酶C，切割Ti質(zhì)粒時，使用限制酶A和酶B。

（2）導入的抗蟲基因應在T-DNA上。酶A和酶C切割形成的黏性末端相同，使用酶B和酶C切取抗蟲基因，使用酶A和酶B切割Ti質(zhì)粒，再將二者用DNA連接酶連接形成重組質(zhì)粒，成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒含有0個限制酶A的識別位點，含有2個限制酶C的識別位點，因此若用酶C處理該重組質(zhì)粒，將得到2個DNA片段。

（3）分析圖1可知，若抗蟲基因插入的位置在R基因內(nèi)部，T-DNA中含有的S基因能表達，R基因的結(jié)構(gòu)因遭到破壞而不能表達，導致植物生根瘤。所以篩選出生根瘤植株即是成功導入抗蟲基因的棉花植株。

Ⅱ.（4）科學家米爾斯坦和柯勒提出單克隆抗體制備技術(shù)的實驗方案：把一種B淋巴細胞與能在體外大量增殖的骨髓瘤細胞進行誘導融合，使融合細胞既能大量增殖，又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體。

（5）動物細胞融合后形成的是單核細胞。因細胞融合具有一定的隨機性，因此需要在特定的選擇培養(yǎng)基上篩選出融合的雜交瘤細胞，并進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，以得到足夠數(shù)量的符合要求的單核雜交瘤細胞。

（6）若將雜交瘤細胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，可從（細胞）培養(yǎng)液中提取出大量的單克隆抗體。

（7）抗體的化學本質(zhì)是蛋白質(zhì)，若要改造鼠源性抗體分子的結(jié)構(gòu)，應該使用蛋白質(zhì)工程技術(shù)。

考點：本題考查基因工程、動物細胞融合、單克隆抗體的相關(guān)知識，意在考查學生能理解所學知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，能從題圖中提取有效信息并運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確結(jié)論能力。