Question

（8分）由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人將地衣芽孢桿菌的α-淀粉酶基因轉(zhuǎn)入酵母菌中經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種（過(guò)程如圖甲所示）。

（1）圖甲中，過(guò)程①需要的酶有____                __。為達(dá)到篩選目的，平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應(yīng)以______作為唯一碳源。②、③過(guò)程需要重復(fù)幾次，目的是___                                     __。

（2）某同學(xué)嘗試過(guò)程③的操作，其中一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示。該同學(xué)的接種方法是________________；推測(cè)該同學(xué)接種時(shí)可能的操作失誤是______________。

（3）以淀粉為原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的適宜條件下密閉發(fā)酵，接種_______菌的發(fā)酵罐需要先排氣，其原因是_____          _____________________。

（4）若要對(duì)培養(yǎng)液中的酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，下表是取0.1ml菌液進(jìn)行涂布時(shí)，不同稀釋倍數(shù)下統(tǒng)計(jì)的平板培養(yǎng)基上的菌落數(shù)：

稀釋倍數(shù)	103	104	105
重復(fù) 實(shí)驗(yàn)	1	1498	126	12
2	1208	128	9
3	1189	133	6

根據(jù)表中數(shù)據(jù)估算培養(yǎng)液中酵母菌的濃度約為_______        個(gè)/ml  

 

Answer 1

【答案】

（1）限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶 （答全給分）   淀粉      進(jìn)一步篩選純化獲得分解淀粉能力強(qiáng)的酵母菌    （2）稀釋涂布平板法     涂布不均勻   （3）工程酵母      工程菌分解淀粉產(chǎn)生葡萄糖的能力強(qiáng)，導(dǎo)致酒精發(fā)酵產(chǎn)生CO₂的速率更快    （4）1.29×10⁷

【解析】

試題分析：（1）基因工程中需要的酶是限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。為了篩選得到了可高效利用淀粉的酵母菌菌種，培養(yǎng)基應(yīng)該以淀粉作為唯一的碳源。②、③過(guò)程重復(fù)幾次，目的是進(jìn)一步篩選純化獲得分解淀粉能力強(qiáng)的酵母菌。（2）根據(jù)乙圖，采用的接種方法是稀釋涂布平板法，由于菌落分布不均勻，可能是在接種時(shí)沒(méi)有做到涂抹均勻。(3)由于工程酵母菌分解淀粉產(chǎn)生葡萄糖的能力更強(qiáng)，在密閉發(fā)酵時(shí)產(chǎn)生CO₂的速率更快，所以在接種工程酵母菌時(shí)需要先進(jìn)行排氣處理。（4）根據(jù)表中數(shù)據(jù)估算培養(yǎng)液中酵母菌的濃度約為1.29×10⁷個(gè)/ml。

考點(diǎn)：本題考查基因工程、微生物培養(yǎng)的應(yīng)用，意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。