【題目】為增加油菜種子的含油量，研究人員嘗試將酶D基因與位于葉綠體膜上的轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因相連，導(dǎo)入油菜細(xì)胞并獲得了轉(zhuǎn)基因油菜品種。

(1)研究人員依據(jù)基因的已知序列設(shè)計(jì)引物，采用__________法從陸地棉基因文庫中獲取酶D基因，從擬南芥基因文庫中獲取轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因。在上述引物設(shè)計(jì)時(shí)，分別在引物中加入下圖所示酶的識別序列，這樣可以用____________________酶處理兩個(gè)基因后，得到____________端(填圖中字母)相連的融合基因。

(2)將上述融合基因插入右圖所示Ti質(zhì)粒的T－DNA中，構(gòu)建________________并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含______________的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落，再利用__________培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng)，可以得到用于轉(zhuǎn)化的浸染液。

(3)剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時(shí)間，此過程的目的是______________________________，進(jìn)一步篩選后培養(yǎng)獲得轉(zhuǎn)基因油菜。

(4)提取上述轉(zhuǎn)基因油菜的mRNA，在____________酶的作用下獲得cDNA，再依據(jù)________的DNA片段設(shè)計(jì)引物進(jìn)行擴(kuò)增，對擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行檢測，可判斷融合基因是否完________。

【答案】 PCR ClaⅠ(限制酶)和DNA連接 A、D 表達(dá)載體(或“重組質(zhì)粒”) 四環(huán)素 液體 利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思?xì)胞 逆轉(zhuǎn)錄 融合基因 轉(zhuǎn)錄

【解析】試題分析：本題以增加油菜種子的含油量為材料背景，考查基因工程的相關(guān)知識，關(guān)鍵能夠掌握目的基因獲取的方法，能夠結(jié)合圖解中限制酶切點(diǎn)選擇合成的工具酶獲得融合基因，同時(shí)掌握目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞以及目的基因檢測與鑒定的方法等，再結(jié)合題意，就能準(zhǔn)確解答該題。

（1）研究人員依據(jù)基因的已知序列設(shè)計(jì)引物，采用PCR法從陸地棉基因文庫中獲取酶D基因，從擬南芥基因文庫中獲取轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因。在上述引物設(shè)計(jì)時(shí)，分別在引物中加入如圖甲所示酶的識別序列，這樣可以用ClaⅠ限制酶和DNA連接酶處理兩個(gè)基因后，得到A、D端相連的融合基因。

（2）將上述融合基因插入圖乙所示Ti質(zhì)粒的T-DNA中，構(gòu)建表達(dá)載體即重組質(zhì)粒并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落，再利用液體培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng)，可以得到用于轉(zhuǎn)化的浸染液。

（3）剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時(shí)間，此過程的目的是利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思?xì)胞。

（4）提取上述轉(zhuǎn)基因油菜的mRNA，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下獲得cDNA，再依據(jù)融合基因的DNA片段設(shè)計(jì)引物進(jìn)行擴(kuò)增，對擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行檢測，可判斷融合基因是否完成轉(zhuǎn)錄。

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】某生物小組在對人類抗維生素D佝僂病的遺傳情況進(jìn)行調(diào)查時(shí)，發(fā)現(xiàn)某地區(qū)人群中雙親都患病的幾百個(gè)家庭中女兒全部患病，兒子正常與患病的比例為1：2。下列對調(diào)查結(jié)果的解釋正確的是

A．抗維生素D佝僂病是一種隱性遺傳病

B．抗維生素D佝僂病是一種常染色體遺傳病

C．被調(diào)查的母親中雜合子占2／3

D．被調(diào)查的父親中雜合子占2／3

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】我國參與了抗擊甲型H1N1流感的國際性合作，并已經(jīng)研制出了甲型H1N1流感疫苗．下圖所示為甲型H1N1病毒在人體細(xì)胞中的一些變化以及相關(guān)反應(yīng)．

（1）人體內(nèi)首先通過___________免疫過程阻止甲型H1N1流感病毒的散播，注射甲型H1N1流感疫苗可預(yù)防甲型H1N1流感，疫苗的作用是_______．

（2）圖中物質(zhì)b的名稱是____________，D細(xì)胞的作用是__________．

（3）據(jù)圖分析，甲型H1N1病毒蛋白質(zhì)的合成過程與正常人體細(xì)胞合成蛋白質(zhì)過程相比較，主要區(qū)別是前者沒有__________過程，而后者有．

（4）細(xì)胞免疫中，T淋巴細(xì)胞可以被吞噬了抗原的巨噬細(xì)胞活化，也可以因受到___________刺激而活化．

（5）某研究生認(rèn)為某植物的提取液對甲型H1N1流感病毒有抑制作用，他以豬為研究材料設(shè)計(jì)了下面的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行證明．

實(shí)驗(yàn)步驟：

①選擇一只健康的豬，讓豬感染甲型H1N1流感病毒．

②在喂養(yǎng)豬的飼料中加入一定量的該植物提取液，觀察豬是否出現(xiàn)患病癥狀．該實(shí)驗(yàn)存在明顯的不科學(xué)之處，請指出：①______；②__．

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】如圖是高等生物細(xì)胞有氧呼吸過程的圖解，據(jù)圖回答：
（1）葡萄糖被分解是有氧呼吸第階段，其場所是 ．
（2）圖中①、③所代表的物質(zhì)分別是 ．
（3）④、⑤、⑥代表能量，其中最多的代號是 ．
（4）[H]與O2結(jié)合生成②的過程，發(fā)生的場所是 ．
（5）有氧呼吸的反應(yīng)式： ．
（6）人體肌細(xì)胞內(nèi)如果缺氧，C6H12O6氧化的最終產(chǎn)物是 ．
（7）在呼吸作用過程中，若有CO2放出，可以推測一定是產(chǎn)生的無氧呼吸．

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】膝反射進(jìn)行時(shí)，伸肌收縮的同時(shí)屈肌舒張。如圖為膝反射示意圖，其中①～④表示結(jié)構(gòu)。有關(guān)敘述錯誤的是

A. 用適宜電流刺激A，可產(chǎn)生膝反射

B. 膝反射的反射弧為二元反射弧，其反射中樞是②

C. 膝反射的感受器和效應(yīng)器均位于伸肌中

D. 用適宜強(qiáng)度的電流刺激B處，僅結(jié)構(gòu)③上電位表指針會偏轉(zhuǎn),結(jié)構(gòu)④上不偏轉(zhuǎn)

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】做模擬孟德爾雜交實(shí)驗(yàn)，用4 個(gè)大信封，按照下表分別裝入一定量的卡片。下列敘述正確的是

A. “雄1”中Y、y 的數(shù)量與“雌1”中Y、y 的數(shù)量可以不相等

B. 分別從“雄1”和“雌1”內(nèi)隨機(jī)取出1 張卡片，記錄組合類型，模擬基因的自由組合

C. 分別從“雄1”和“雌2”內(nèi)隨機(jī)取出1 張卡片，記錄組合類型，模擬配子的隨機(jī)結(jié)合

D. 每次分別從4 個(gè)信封內(nèi)隨機(jī)取出1 張卡片，記錄組合類型，重復(fù)20次，直到將卡片取完

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】以狗為實(shí)驗(yàn)對象，研究心臟的神經(jīng)支配及作用。實(shí)驗(yàn)過程中，先測定正常情況下的心率，然后分別測定僅阻斷神經(jīng)甲和神經(jīng)乙后的心率。結(jié)果如下表所示。

據(jù)此分析，下列敘述錯誤的是

A. 神經(jīng)甲的作用是使心率減慢 B. 神經(jīng)乙的作用是使心率加快

C. 心臟受神經(jīng)甲和神經(jīng)乙共同支配 D. 神經(jīng)乙對心率的影響比神經(jīng)甲強(qiáng)

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】圖示細(xì)胞內(nèi)由被膜小泡運(yùn)輸物質(zhì)的過程，請據(jù)圖分析回答：

（1）在細(xì)胞內(nèi)吞過程中，被吞入的物質(zhì)要與細(xì)胞膜上的__________蛋白結(jié)合，內(nèi)陷形成內(nèi)吞泡。內(nèi)吞泡與內(nèi)含多種水解酶的丙融合形成丁。除了圖中所示的功能以外，丙還能夠分解__________，以保持細(xì)胞的功能穩(wěn)定。

（2）在圖中戊上所進(jìn)行的過程稱為__________，形成的產(chǎn)物在甲中加工成具有一定__________的蛋白質(zhì)，這是它們具有生物活性的前提。COPⅡ被膜小泡負(fù)責(zé)__________方向的“貨物”運(yùn)輸。在乙中，蛋白質(zhì)被分揀，有目的地送往__________。下列物質(zhì)中，需要經(jīng)過COPⅡ被膜小泡運(yùn)輸并經(jīng)過a過程的是__________。

a．唾液淀粉酶 b．生長激素 c．抗體 d．細(xì)胞膜上載體

（3）若定位在甲中的某些蛋白偶然摻入乙，則圖中__________可以幫助實(shí)現(xiàn)它們的回收。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】如圖所示：甲圖中①②表示目鏡，③④表示物鏡，⑤⑥表示物鏡與載玻片之間的距離，乙和丙分別表示不同物鏡下觀察到的圖象．下面描述正確的是（ ）
A.觀察物鏡丙時(shí)應(yīng)選用甲中①④⑥組合
B.從圖中的乙轉(zhuǎn)為丙，正確調(diào)節(jié)順序：轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器→調(diào)節(jié)光圈→移動標(biāo)本→轉(zhuǎn)動細(xì)準(zhǔn)焦螺旋
C.若丙是由乙放大10倍后的物像，則細(xì)胞的面積增大為原來的10倍
D.若丙圖觀察到的細(xì)胞是位于乙圖右上方的細(xì)胞，從圖中的乙轉(zhuǎn)為丙時(shí)，應(yīng)向右上方移動裝片

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