Question

回答有關基因工程的問題：
（1）構建基因工程表達載體時，用不同類型的限制性核酸內切酶切割DNA后，可能產(chǎn)生粘性末端，也可能產(chǎn)生

 

末端．若要在限制性核酸內切酶切割目的基因和質粒后使其直接進行連接，則應選擇能使二者產(chǎn)生

 

（相同、不同）粘性末端的限制性核酸內切酶．
（2）利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素時，在用表達載體（重組質粒）轉化大腸桿菌時，常用

 

處理大腸桿菌，以利于表達載體進入；為了檢測胰島素基因是否轉錄出了mRNA，可用標記的胰島素基因片段作探針與mRNA雜交，該雜交技術稱為

 

．為了檢測胰島素基因轉錄的mRNA是否翻譯成

 

，常用抗原-抗體雜交技術．
（3）如果要將某目的基因通過農(nóng)桿菌轉化法導入植物細胞，先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質粒的

 

中，然后用該農(nóng)桿菌感染植物細胞，通過DNA重組將目的基因插入植物細胞的

 

上．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術

專題：

分析：1、限制酶主要從原核生物中分離純化出來，能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，形成黏性末端和平末端兩種．
2、目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術； ②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術； ③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
3、將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法最常用的是農(nóng)桿菌轉化法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法（Ca²⁺處理法）．

解答： 解：（1）用不同類型的限制性核酸內切酶切割DNA后，可能產(chǎn)生粘性末端，也可能產(chǎn)生平末端．若要在限制性核酸內切酶切割目的基因和質粒后使其直接進行連接，則應選擇能使二者產(chǎn)生相同粘性末端的限制性核酸內切酶．
（2）在用表達載體（重組質粒）轉化大腸桿菌時，常用Ca²⁺處理大腸桿菌，使細菌變成感受態(tài)細胞以利于表達載體進入；為了檢測胰島素基因是否轉錄出了mRNA，可用標記的胰島素基因片段作探針與mRNA雜交，該雜交技術稱為分子雜交技術．為了檢測胰島素基因轉錄的mRNA是否翻譯成人胰島素，常用抗原-抗體雜交技術．
（3）如果要將某目的基因通過農(nóng)桿菌轉化法導入植物細胞，先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質粒的T-DNA中，然后用該農(nóng)桿菌感染植物細胞，通過DNA重組將目的基因插入植物細胞的染色體的DNA上．
故答案為：
（1）平　          相同　
（2）Ca²⁺　     分子雜交技術　      人胰島素　
（3）T-DNA　    染色體的DNA

點評：本題考查基因工程的相關知識，意在考查考生能運用所學知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學問題進行解釋、推理，做出合理的判斷或的能力．將目的基因導入微生物細胞．原核生物作為受體細胞的原因是繁殖速度快、多為單細胞、遺傳物質相對較少．