Question

6．干擾素是能夠抑制多種病毒復制的抗病毒物質．科學家利用基因工程技術從人的T淋巴細胞中提取干擾素基因轉入羊的DNA中，培育出羊乳腺生物反應器，使羊乳汁中含有人體干擾素．請回答：
（1）研究人員用DNA測序儀顯示了基因組的某DNA片段一條鏈的堿基排列順序圖片．其中圖1的堿基排列順序已經(jīng)解讀，其順序是：GGTTATGCGT，請解讀圖2顯示的堿基排列順序：GATGCGTTCG．
（2）科學家從相關基因組中獲取了干擾素基因，并采用PCR技術對干擾素基因進行擴增，然后將干擾素基因與質粒等載體組合形成了重組載體．在重組載體的構建過程中需要的工具酶有限制酶、DNA連接酶．
（3）科學家將干擾素基因與羊乳腺蛋白基因的啟動子等調控組件重組在一起，通過顯微注射等方法，導入羊的受精卵細胞中，通過系列操作培育轉基因動物．
（4）如何檢測和鑒定目的基因已被成功導入羊體內？請寫出兩種方法．
DNA分子雜交；DNA與mRNA分子雜交．

Answer 1

分析 基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）圖1的堿基排列順序是：GGTTATGCGT，由此可知圖中堿基序列應從下向上解讀，根據(jù)已知的堿基序列可知從左向右四種堿基依次是ACGT，所以圖2中堿基序列是GATGCGTTCG．
（2）可采用PCR技術體外擴增目的基因（干擾素基因）；構建基因表達載體時，首先需要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子，其次還需要用DNA連接酶連接目的基因和運載體形成重組DNA分子．
（3）基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；受精卵的全能性最高，因此培育轉基因動物時，一般選用受精卵作為受體細胞．
（4）檢測目的基因是否導入受體細胞的方法：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術，②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術．
故答案為：
（1）GATGCGTTCG
（2）PCR    限制酶、DNA連接酶
（3）乳腺蛋白    啟動子    顯微注射法   受精卵    
（4）DNA分子雜交   DNA與mRNA分子雜交

點評 本題考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟，掌握各步驟中的相關細節(jié)及基因工程的應用，能結合所學的知識準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．