Question

6．從自然界微生物中篩選某菌種的一般步驟是：采集菌樣→富集培養(yǎng)→純種分離→性能測(cè)定．
（1）不同微生物的生存環(huán)境不同，獲得理想微生物的第一步是從適合的環(huán)境采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化．培養(yǎng)噬鹽菌的菌樣應(yīng)從海灘等高鹽環(huán)境采集．
（2）富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適合待分離微生物旺盛生長(zhǎng)的特定環(huán)境條件，使其數(shù)量大大增加，從而分離出所需微生物的培養(yǎng)方法．對(duì)產(chǎn)耐高溫淀粉酶微生物的富集培養(yǎng)應(yīng)選擇以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基，并在高溫條件下培養(yǎng)．
（3）接種前要對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌處理．在整個(gè)微生物的分離和培養(yǎng)中，一定要注意在無(wú)菌條件下進(jìn)行．
（4）如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖，請(qǐng)分析接種的具體方法．

獲得圖A效果的接種方法是稀釋涂布平板法，圖B效果的接種方法是平板劃線法．一同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過(guò)高，應(yīng)當(dāng)怎樣操作？
（5）如果探究溫度對(duì)纖維素酶活性的影響，自變量是溫度，應(yīng)該保持纖維素的量與濃度、反應(yīng)時(shí)間、pH等不變（至少答兩項(xiàng)）．

Answer 1

分析 篩選目的菌株一般是從適合的環(huán)境采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化．常用的接種方法是稀釋涂布平板法和平板劃線法．培養(yǎng)基的配制時(shí)，各種成分在溶化后分裝前必須進(jìn)行pH調(diào)整，接種前要進(jìn)行滅菌，保證無(wú)菌操作，培養(yǎng)微生物時(shí)，應(yīng)將培養(yǎng)皿倒置．

解答 解：（1）噬鹽菌的菌樣應(yīng)從高鹽環(huán)境采集，如高鹽海灘等．
（2）目的微生物能夠產(chǎn)生淀粉酶說(shuō)明其碳源是淀粉，篩選菌株時(shí)應(yīng)選擇以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基，并在高溫條件下培養(yǎng)．
（3）配制培養(yǎng)基時(shí)各種成分在溶化后分裝前必須進(jìn)行調(diào)整pH，接種前要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，在實(shí)驗(yàn)中要注意在無(wú)菌條件下進(jìn)行?
（4）據(jù)圖分析，A培養(yǎng)皿中的菌落均勻?qū)儆谙♂屚坎计桨宸ń臃N，B培養(yǎng)皿中的菌落分為5個(gè)區(qū)域，屬于平板劃線法接種．題干中的同學(xué)的操作結(jié)果的原因是菌液濃度過(guò)高（或培養(yǎng)過(guò)程被雜菌污染），所以應(yīng)該增大稀釋倍數(shù)（或嚴(yán)格無(wú)菌操作，原因與操作要對(duì)應(yīng)）．
（5）如果探究溫度對(duì)纖維素酶活性的影響，自變量是溫度，而無(wú)關(guān)變量應(yīng)保持相同且適宜，因此應(yīng)該保持纖維素的量與濃度、反應(yīng)時(shí)間、pH等不變．
故答案為：
（1）海灘等高鹽   
（2）以淀粉為惟一碳源   高溫
（3）高壓蒸汽滅菌   無(wú)菌
（4）稀釋涂布平板法   平板劃線法   菌液濃度過(guò)高    增大稀釋倍數(shù)（或培養(yǎng)過(guò)程被雜菌污染   嚴(yán)格無(wú)菌操作；或用接種環(huán)劃下一區(qū)域前接種環(huán)沒(méi)有滅菌   每劃一個(gè)新區(qū)域前都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)行滅菌處理）（原因與操作要對(duì)應(yīng)）
（5）溫度   纖維素的量與濃度、反應(yīng)時(shí)間、pH

點(diǎn)評(píng) 微生物的分離要根據(jù)微生物不同的嗜好，配制不同的培養(yǎng)基，有的根據(jù)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的特殊的需求，比如尿素分解菌是氮源是尿素，纖維素分解菌的碳源是纖維素；有的根據(jù)環(huán)境的要求，比如葡萄球菌能夠耐高濃度的鹽溶液，可以在培養(yǎng)基中加入高濃度的氯化鈉等，在復(fù)習(xí)的過(guò)程中注意總結(jié)．