Question

回答下列關(guān)于基因工程的問題
如圖1是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線，表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點(diǎn)，圖2、圖3中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)．

限制酶	BamHⅠ	HindⅢ	EcoRⅠ	Sma
識別序列及切割位點(diǎn)

（1）若對圖2中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性如何變化，為什么？

 

（2）圖中將人乳鐵蛋白基因插入質(zhì)粒，可以只用EcoR I同時(shí)酶切質(zhì)粒和人乳鐵蛋白基因，也可以使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時(shí)酶切質(zhì)粒和人乳鐵蛋白基因，后一個(gè)方法的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止

 

．
（3）為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入

 

酶．重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了

 

．
（4）圖1過程①可采用的操作方法是

 

，過程②可采用的生物技術(shù)是

 

．過程③可采用的生物技術(shù)是

 

．
（5）分別從分子水平簡述雌性轉(zhuǎn)基因牛分泌人乳鐵蛋白的過程是

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),胚胎移植

專題：

分析：此題考查的技術(shù)手段有基因工程原理及技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，圖2、3代表的是根據(jù)質(zhì)粒和目的基因的酶切位點(diǎn)選取所用限制酶，圖1將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞后進(jìn)行胚胎移植產(chǎn)生能產(chǎn)生目的基因表達(dá)產(chǎn)物個(gè)體的過程．

解答： 解：（1）SmaⅠ識別的核苷酸序列為：，G和C之間可以形成三個(gè)氫鍵，A和T之間可以形成二個(gè)氫鍵，所以SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多G、C含量越多，氫鍵越多，熱穩(wěn)定性就越高．
（2）只使用EcoR I，則質(zhì)粒和目的基因兩端的粘性末端相同，用連接酶連接時(shí)，會產(chǎn)生質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化；而利用BamHⅠ和HindⅢ剪切時(shí)，質(zhì)粒和目的基因兩端的粘性末端不同，用DNA連接酶連接時(shí)，不會產(chǎn)生自身環(huán)化．
（3）DNA連接酶作用是連接DNA片段，在連接質(zhì)粒和目的基因時(shí)用到，而質(zhì)粒本身所攜帶的抗性基因的目的就是供重組質(zhì)粒的鑒定和選擇，所以答案是篩選．   
（4）過程①是將目的基因?qū)�入動物受精卵，所用方法是顯微注射法；過程②是早期胚胎培養(yǎng)，需要利用的技術(shù)是動物細(xì)胞培養(yǎng)；過程③是將早期胚胎移入代孕母體中所用技術(shù)為胚胎移植．
（5）此題主要考查基因指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成過程，即通過DNA轉(zhuǎn)錄mRNA，再以mRNA為模板翻譯出相關(guān)蛋白質(zhì)．
故答案為：
（1）SmaⅠ識別的核苷酸序列為：，G和C之間可以形成三個(gè)氫鍵，A和T之間可以形成二個(gè)氫鍵，所以SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多G、C含量越多，氫鍵越多，熱穩(wěn)定性就越高
（2）質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化
（3）DNA連接酶        篩選
（4）顯微注射法      動物細(xì)胞培養(yǎng)       胚胎移植
（5）DNA轉(zhuǎn)錄形成mRNA，再以mRNA為模板翻譯出蛋白質(zhì)

點(diǎn)評：此題考查內(nèi)容較為基礎(chǔ)，對于DNA穩(wěn)定性和限制酶特點(diǎn)的聯(lián)系考查，以及質(zhì)粒作為運(yùn)載體的條件和一些現(xiàn)代生物技術(shù)的應(yīng)用，中心法則內(nèi)容的概括等，這些主要是識記．