Question

【題目】新型冠狀病毒（2019-nCoV）肺炎疫情，對我國民生健康和經(jīng)濟(jì)造成極大影響。新型冠狀病毒相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室檢測技術(shù)，對新型冠狀病毒的診斷與防控尤為重要。新型冠狀病毒的檢測最常見方法的是熒光定量RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)），RT-PCR的具體過程如圖�；卮鹣铝邢蝾}：

（1）過程Ⅰ和Ⅱ都需要加入緩沖液、原料、酶和引物等，其中加入的酶分別是_______________，________________。

（2）RT-PCR過程通過對_____________的控制影響確的活性和DNA分子結(jié)構(gòu)，從而使得整個反應(yīng)過程有序地進(jìn)行。

（3）過程Ⅱ擬對單鏈cDNA進(jìn)行n次循環(huán)的擴(kuò)增，理論上需要_______個引物B。

（4）新型冠狀病毒的檢測方法還可采用病毒抗原檢測、病毒抗體檢測，這些檢測方法的原理是_____________。檢測到新冠病毒感染者抗體滯后于病毒核酸和抗原的理由是____________________________________，因此__________檢測對傳染性極高的新型冠狀病毒（2019 - nCoV）疑似患者早期確診意義不大。

Answer 1

【答案】逆（反）轉(zhuǎn)錄酶 熱穩(wěn)定性高的DNA聚合酶（Taq酶） 溫度（或溫度、pH） 2n-1 抗原和抗體發(fā)生特異性結(jié)合 病毒進(jìn)入人體后，刺激人體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生相應(yīng)的抗體需要一段時間 病毒抗體

【解析】

1、分析圖示，過程I是由mRNA形成cDNA的過程，表示逆轉(zhuǎn)錄。過程Ⅱ先使mRNA-cDNA雜合雙鏈解開，再以單鏈的DNA合成雙鏈的DNA，最后利用RCR技術(shù)進(jìn)行DNA復(fù)制。

2、PCR技術(shù)的原理是模擬生物體內(nèi)DNA分子復(fù)制的過程，利用DNA分子熱變形原理，通過控制溫度控制控制DNA分子的解聚和結(jié)合，DNA分子體內(nèi)復(fù)制過程DNA的解旋是在解旋酶的作用下實(shí)現(xiàn)的；PCR擴(kuò)增DNA片段過程最高經(jīng)過n次擴(kuò)增，形成的DNA分子數(shù)是2n個，其中只有2條單鏈不含有引物。

（1）過程I是由mRNA形成cDNA的過程，表示逆轉(zhuǎn)錄過程，需要加入逆轉(zhuǎn)錄酶，過程Ⅱ是PCR過程，需要加入熱穩(wěn)定性高的DNA聚合酶（Taq酶）。

（2）RT-PCR過程通過對溫度的控制影響確的活性和DNA分子結(jié)構(gòu)，從而使得整個反應(yīng)過程有序地進(jìn)行。

（3）過程Ⅱ擬對單鏈cDNA進(jìn)行n次循環(huán)的擴(kuò)增，根據(jù)DNA分子半保留復(fù)制特點(diǎn)可知，該過程理論上至少需要2n-1個引物B。

（4）新型冠狀病毒的檢測方法還可采用病毒抗原-抗體檢測，其原理是抗原和抗體發(fā)生特異性結(jié)合。病毒進(jìn)入人體后，刺激人體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生相應(yīng)的抗體需要一段時間，故檢測到新冠病毒感染者抗體滯后于病毒核酸和抗原，因此病毒抗體檢測對傳染性極高的新型冠狀病毒疑似患者早期確診意義不大。