Question

科學(xué)家將綠色熒光蛋白（GFP）基因轉(zhuǎn)入小鼠胚胎干細(xì)胞（ES）內(nèi)，GFP基因表達(dá)就會(huì)使細(xì)胞帶有綠色熒光的，繼而利用帶有綠色熒光的ES細(xì)胞培育出嵌合型的小鼠用于科學(xué)研究，流程如圖．請(qǐng)回答：

（1）在步驟①中，若綠色熒光蛋白（GFP）基因是cDNA片段，則在GFP基因的上游必須加入

 

，該核苷酸序列是

 

酶識(shí)別和結(jié)合的部位．
（2）步驟②的受體細(xì)胞是小鼠ES細(xì)胞，ES細(xì)胞一般從囊胚的

 

分離得到．在培養(yǎng)ES細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞充滿培養(yǎng)皿底部后停止分裂，這種現(xiàn)象稱為

 

．
（3）為獲取更多卵母細(xì)胞，首先要對(duì)供體母鼠注射促性腺激素，使其

 

，然后可用人工方法從小鼠輸卵管內(nèi)獲得，該過程稱為

 

．
（4）圖中重組囊胚在步驟⑤之前要先檢測(cè)是否有

 

，再通過

 

技術(shù)移入代孕母鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),胚胎移植

專題：

分析：分析題圖：圖示為是轉(zhuǎn)基因綠色熒光嵌合小鼠的培育過程，其中①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；②表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過程；③表示受精作用；④表示早期胚胎發(fā)育過程；⑤表示胚胎移植過程；⑥表示妊娠產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因鼠的過程．

解答： 解：（1）在步驟①中，若綠色熒光蛋白（GFP）基因是cDNA片段，cDNA片段中沒有啟動(dòng)子，而基因表達(dá)載體的組成中必需要有啟動(dòng)子，故在GFP基因的上游必須加入啟動(dòng)子，該核苷酸序列是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位．
（2）步驟②的受體細(xì)胞是小鼠ES細(xì)胞，ES細(xì)胞一般從囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離得到．在培養(yǎng)ES細(xì)胞時(shí)，細(xì)胞充滿培養(yǎng)皿底部后停止分裂，這種現(xiàn)象稱為接觸抑制．
（3）為獲取更多卵母細(xì)胞，首先要對(duì)供體母鼠注射促性腺激素，使其超數(shù)排卵，然后可用人工方法從小鼠輸卵管內(nèi)獲得，該過程稱為沖卵．
（4）圖中重組囊胚在步驟⑤之前要先檢測(cè)是否有綠色熒光細(xì)胞，再通過胚胎移植技術(shù)移入代孕母鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育．
故答案為：
（1）啟動(dòng)子        RNA聚合
（2）內(nèi)細(xì)胞團(tuán)      接觸抑制
（3）超數(shù)排卵       沖卵
（4）綠色熒光細(xì)胞          胚胎移植

點(diǎn)評(píng)：本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因鼠的培育過程示意圖，考查了基因工程、動(dòng)物細(xì)胞工程、胚胎工程等多個(gè)現(xiàn)代生物技術(shù)，意在考查考生的識(shí)記能力和綜合運(yùn)用能力．考生要能夠把握所學(xué)知識(shí)的內(nèi)在聯(lián)系，識(shí)記相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，如：基因表達(dá)載體的構(gòu)成、胚胎干細(xì)胞的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的過程；考生還要能夠明確動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和胚胎移植技術(shù)在動(dòng)物基因工程中的應(yīng)用．