Question

【題目】X-連鎖重癥聯(lián)合免疫缺陷是一種單基因遺傳病，患者缺乏特異性免疫機(jī)能。研究人員嘗試對20名患病兒童進(jìn)行基因治療。他們提取并培養(yǎng)患者的造血干細(xì)胞，然后利用逆轉(zhuǎn)錄病毒載體將正�；�因插入細(xì)胞的染色體中，最后將改造后的造血干細(xì)胞移植給患者。這些患者的免疫缺陷被治愈了，但有5名兒童罹患了白血病。回答下列問題：

（1）逆轉(zhuǎn)錄病毒載體是對天然逆轉(zhuǎn)錄病毒改造獲得的，改造時(shí)要破壞逆轉(zhuǎn)錄病毒的外殼蛋白基因等對細(xì)胞有害的基因，增加________酶作用位點(diǎn)和________基因。

（2）利用_______________技術(shù)可以檢測正�；�因是否已成功插入細(xì)胞的染色體中。

（3）研究人員在培養(yǎng)造血干細(xì)胞過程中，需將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中，CO2的主要作用是______。培養(yǎng)過程中應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，目的是________________。

（4）與用捐贈者的造血干細(xì)胞進(jìn)行移植相比，基因治療的優(yōu)點(diǎn)是_________。但基因治療也有一定的風(fēng)險(xiǎn)，例如上文中患兒白血病的致病原因是_____________。

Answer 1

【答案】限制 標(biāo)記 DNA分子雜交 維持培養(yǎng)液的pH 清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害 不會發(fā)生免疫排斥 外源基因插入原癌基因（或抑癌基因）中導(dǎo)致細(xì)胞癌變

【解析】

本題文利用的相關(guān)知識：逆轉(zhuǎn)錄病毒載體是基因工程中基因表達(dá)載體，載體需要具備有一個至多個限制酶切割位點(diǎn)、有特殊的標(biāo)記基因等條件；可以利用DNA分子雜交等技術(shù)檢測目的基因；基因治療的優(yōu)點(diǎn)是不會發(fā)生免疫排斥。以此解答問題。

（1）作為運(yùn)載體需要具備能自我復(fù)制；有一個至多個限制酶切割位點(diǎn)；有特殊的標(biāo)記基因等條件。依據(jù)題文可知，改造逆轉(zhuǎn)錄病毒基因時(shí)，需要增加限制酶作用位點(diǎn)和標(biāo)記基因。

（2）根據(jù)目的基因的檢測和鑒定可知，檢測正常基因是否已成功插入細(xì)胞的染色體中，應(yīng)該用DNA分子雜交技術(shù)。

（3）培養(yǎng)造血干細(xì)胞過程中，需將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH，從而為細(xì)胞內(nèi)酶的活性提供適宜的pH條件。培養(yǎng)過程中應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，目的是清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害。

（4）依識記內(nèi)容可知，基因治療的優(yōu)點(diǎn)是不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。癌變是原癌基因或抑癌基因突變的結(jié)果，題文中患兒白血病的致病原因是外源基因插入原癌基因（或抑癌基因）中導(dǎo)致基因突變從而細(xì)胞癌變。