萌發(fā)的小麥種子中有α-淀粉酶和β-淀粉酶.α-淀粉酶較耐熱,但在pH為3.6下可迅速失活,而β-淀粉酶不耐熱,在70℃條件下15min后失活.
實驗材料和用具:萌發(fā)的小麥種子、麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)液、5%淀粉溶液、斐林試劑、蒸餾水、水浴鍋等.
實驗步驟:
一:制作麥芽糖梯度液.取7支干凈的試管,編號,按表加入試劑后60℃水浴加熱2min.
試劑試管號
1234567
麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)液(mL)00.20.61.01.41.62.0
蒸餾水(mL)2.01.81.41.0XYZ
斐林試劑(mL)2.02.02.02.02.02.02.0
二:用萌發(fā)的小麥種子制備淀粉酶溶液.
三:將裝有淀粉酶溶液的試管70℃水浴15min后迅速冷卻.
四:另取4支試管,編號A、B、C、D,向A、B試管中各加5mL5%淀粉溶液,向C、D試管中各加2mL已經(jīng)處理的酶溶液(忽略其中含有的少量麥芽糖)和蒸餾水,將4支試管40℃水浴10min.將C、D試管中的溶液分別加入到A、B試管中,搖勻后繼續(xù)40℃水浴10min.
五:取A、B試管中反應(yīng)溶液各2mL分別加入E、F試管,然后向E、F試管分別加入
 
,
 
,觀察顏色變化.
結(jié)果分析:將E試管中顏色與第①步中獲得的麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行比較,獲得該試管中麥芽糖濃度,并計算出α-淀粉酶催化效率.請分析回答:
(1)本實驗的目的是測定小麥種子中
 

(2)步驟一的5~7試管中加入蒸餾水的量(X\Y\Z)分別是
 
 
,
 
(單位mL).
(3)實驗中B試管所起的具體作用是檢測實驗使用的淀粉溶液中
 

(4)若要測定另一種淀粉酶的活性,則需在第
 
步驟進(jìn)行改變.
考點:探究影響酶活性的因素,檢測還原糖的實驗
專題:
分析:分析表格:實驗設(shè)計要遵循單一變量原則,1~4號中溶液總量為4ml,為了保證各試管中試劑量相等,表中X應(yīng)為0.6ml、Y應(yīng)為0.4ml、Z應(yīng)為0ml.實驗的步驟三中,將裝有淀粉酶溶液的試管置于70℃水浴中15min,這樣β-淀粉酶已經(jīng)失活,但α-淀粉酶較耐熱,仍具有生物活性,所以本實驗的目的是測定小麥種子中α-淀粉酶催化效率.
解答: 解:根據(jù)圖表可知,向E、F試管分別加入的是2 mL斐林試劑,并在60℃水浴條件下加熱2 min.
(1)β-淀粉酶不耐熱,在70℃條件下15min后失活,而本實驗的步驟三中,將裝有淀粉酶溶液的試管置于70℃水浴中15min,這樣β-淀粉酶已經(jīng)失活,但α-淀粉酶較耐熱,仍具有生物活性,所以本實驗的目的是測定小麥種子中α-淀粉酶催化效率.
(2)實驗設(shè)計要遵循對照原則和單一變量原則,所以各個試管中液體的總量要相等,則步驟一的5~7試管中加入蒸餾水的量(X、Y、Z)分別是0.6mL、0.4mL、0mL.
(3)實驗中B試管起對照作用,具體作用是檢測實驗使用的淀粉溶液中是否存在還原糖.
(4)萌發(fā)的禾谷類種子中淀粉酶活性較強(qiáng),主要有α-淀粉酶和β-淀粉酶.α-淀粉酶不耐酸、較耐熱,在pH為3.6以下迅速失活,而β-淀粉酶不耐熱,在70℃條件下15min后失活.因此要測定另一種淀粉酶的活性,則需在步驟三進(jìn)行改變,即排除α-淀粉酶的干擾.
故答案為:
 2 mL斐林試劑,60℃水浴加熱2 min后
(1)α淀粉酶催化效率  
(2)0.6    0.4    0
(3)是否存在還原糖
(4)三
點評:本題結(jié)合圖表,考查影響酶活性的探究實驗,要求考生掌握實驗設(shè)計需要遵循的原則,即對照原則和單一變量原則,能結(jié)合題干信息“α-淀粉酶不耐酸、較耐熱,在pH為3.6以下迅速失活,而β-淀粉酶不耐熱,在70℃條件下15min后失活”和實驗步驟三的具體操作,判斷該實驗的目的,同時能根據(jù)實驗的單一變量原則,判斷表中X、Y、Z的具體數(shù)值.
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