科目:高中生物 來源:2013屆江蘇省揚州市高三下學(xué)期5月考前適應(yīng)性考試生物試卷(帶解析) 題型:綜合題
研究人員從血管內(nèi)皮瘤中發(fā)現(xiàn)了一種新的血管增生抑制劑——內(nèi)皮抑素,它能有效地抑制血管增生。下面是獲得重組內(nèi)皮抑素的方法,請分析回答下列問題。
(1)從肝細(xì)胞中分離出相應(yīng)的RNA,經(jīng)________獲得內(nèi)皮抑素基因,再經(jīng)________進行擴增,以獲得更多的目的基因。
(2)擴增的目的基因與pUC18質(zhì)粒(如圖所示)都用EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ進行雙酶切,然后用DNA連接酶進行連接,構(gòu)建重組質(zhì)粒。雙酶切避免了目的基因與載體________連接,還減少了目的基因與目的基因、載體與載體的連接,提高了重組質(zhì)粒的比例。
(3)大腸桿菌pUC18質(zhì)粒的LacZ基因中如果沒有插入外源基因,LacZ基因便可表達出β半乳糖苷酶,當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和Xgal時,Xgal便會被β半乳糖苷酶水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落。反之,則形成白色菌落。選擇培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機鹽、水、生長因子等營養(yǎng)物質(zhì)外,還應(yīng)加入的物質(zhì)有________和氨芐青霉素。成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌在培養(yǎng)基中形成________顏色的菌落,原因是__________________。
(4)從選擇培養(yǎng)基中挑取所需的單個菌落接種于液體培養(yǎng)基中培養(yǎng),獲得粗提表達產(chǎn)物。將等量毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞接種于細(xì)胞培養(yǎng)板,37 ℃培養(yǎng)。將等量不同濃度的粗提表達產(chǎn)物加進培養(yǎng)孔中,72 h后在顯微鏡下觀察細(xì)胞存活情況并統(tǒng)計(或記錄)活的內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)目,實驗結(jié)果如下表所示。
粗提表達產(chǎn)物濃度/(μg·mL-1) | 0 | 2 | 4 | 6 | 8 | 10 |
活的內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)目(×102) | 12 | 6 | 2 | 1 | 0.5 | 0.5 |
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科目:高中生物 來源:2011屆河北省南宮中學(xué)高三12月月考生物試卷 題型:綜合題
含有32P或31P的磷酸,兩者化學(xué)性質(zhì)幾乎相同,都可參與DNA分子的組成,但32P比31P質(zhì)量大,F(xiàn)將某哺乳動物的細(xì)胞放在含有31P磷酸的培養(yǎng)基中,連續(xù)培養(yǎng)數(shù)代后得到G0代細(xì)胞。然后將G0代細(xì)胞移至含有32P磷酸的培養(yǎng)基中培養(yǎng),經(jīng)過第1、2次細(xì)胞分裂后分別得到G1、G2代細(xì)胞。再從G0、G1、G2代細(xì)胞中提取出DNA經(jīng)密度梯度離心后得到結(jié)果如圖。由于DNA分子質(zhì)量不同,因此在離心管內(nèi)的分布不同。若①②③分別表示輕、中、重三種DNA分子的位置,請回答:
(1)G0、G1、G2三代DNA離心后的試管分別是圖中的:
G0 、G1 、G2 。
(2)培養(yǎng)基中需加入ATP,說明 。培養(yǎng)基中還需加入
(3)圖中①、②兩條帶中DNA分子所含的元素磷分別是:
條帶① ,條帶② 。
(4)上述實驗結(jié)果證明DNA的復(fù)制方式是 。
(5)DNA能夠準(zhǔn)確復(fù)制原因: 。
(6)用同位素32P、35S分別標(biāo)記噬菌體和大腸桿菌的DNA和蛋白質(zhì),然后進行“噬菌體侵染細(xì)菌實驗”。侵染后產(chǎn)生的子代噬菌體與親代噬菌體形態(tài)完全相同。則子代噬菌體的DNA和蛋白質(zhì)中含有的標(biāo)記元素應(yīng)該是 ( )
A.31P、32P、32S | B.31P、32P、35S |
C.31P、32P、32S、35S | D.33P、32S、35S |
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科目:高中生物 來源:2012-2013學(xué)年江蘇省揚州市高三下學(xué)期5月考前適應(yīng)性考試生物試卷(解析版) 題型:綜合題
研究人員從血管內(nèi)皮瘤中發(fā)現(xiàn)了一種新的血管增生抑制劑——內(nèi)皮抑素,它能有效地抑制血管增生。下面是獲得重組內(nèi)皮抑素的方法,請分析回答下列問題。
(1)從肝細(xì)胞中分離出相應(yīng)的RNA,經(jīng)________獲得內(nèi)皮抑素基因,再經(jīng)________進行擴增,以獲得更多的目的基因。
(2)擴增的目的基因與pUC18質(zhì)粒(如圖所示)都用EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ進行雙酶切,然后用DNA連接酶進行連接,構(gòu)建重組質(zhì)粒。雙酶切避免了目的基因與載體________連接,還減少了目的基因與目的基因、載體與載體的連接,提高了重組質(zhì)粒的比例。
(3)大腸桿菌pUC18質(zhì)粒的LacZ基因中如果沒有插入外源基因,LacZ基因便可表達出β半乳糖苷酶,當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和Xgal時,Xgal便會被β半乳糖苷酶水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落。反之,則形成白色菌落。選擇培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機鹽、水、生長因子等營養(yǎng)物質(zhì)外,還應(yīng)加入的物質(zhì)有________和氨芐青霉素。成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌在培養(yǎng)基中形成________顏色的菌落,原因是__________________。
(4)從選擇培養(yǎng)基中挑取所需的單個菌落接種于液體培養(yǎng)基中培養(yǎng),獲得粗提表達產(chǎn)物。將等量毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞接種于細(xì)胞培養(yǎng)板,37 ℃培養(yǎng)。將等量不同濃度的粗提表達產(chǎn)物加進培養(yǎng)孔中,72 h后在顯微鏡下觀察細(xì)胞存活情況并統(tǒng)計(或記錄)活的內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)目,實驗結(jié)果如下表所示。
粗提表達產(chǎn)物濃度/(μg·mL-1) |
0 |
2 |
4 |
6 |
8 |
10 |
活的內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)目(×102) |
12 |
6 |
2 |
1 |
0.5 |
0.5 |
實驗結(jié)果說明_____________________________________________________
_____________________________________________________________。
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科目:高中生物 來源:2011-2012學(xué)年北京市海淀區(qū)高三上學(xué)期期中練習(xí)生物試卷 題型:綜合題
(10分)研究人員從血管內(nèi)皮瘤中發(fā)現(xiàn)了一種新的血管增生抑制劑一內(nèi)皮抑素,它能有效地抑制血管增生。下面是獲得重組內(nèi)皮抑素的方法,請分析回答下列問題:
(1) 從肝細(xì)胞中分離總RNA,經(jīng)_________獲得cDNA,之后經(jīng)過_________擴增內(nèi)皮抑素基因。
(2) 擴增的目的基因與PUC18質(zhì)粒(如圖14所示)都用EcoR I和BamH I進行雙酶切,然后用DNA連接酶進行連接,構(gòu)建重組質(zhì)粒。雙酶切避免了目的基因與載體________連接,還減少了________的連接,提高了重組質(zhì)粒的比例。
(3) 大腸桿菌pUC18質(zhì)粒的LacZ基因中如果沒有插入外源基因,lacZ基因便可表達出β-半乳糖苷酶,當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時,X-gal便會被β-半乳糖苷酶水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落。反之,則形成白色菌落。
選擇培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無機鹽、水、生長因子等營養(yǎng)物質(zhì)外,還應(yīng)加入_______物質(zhì)。成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌在培養(yǎng)基中形成______________顏色的菌落,原因是_____________________。之所以選擇大腸桿菌作為基因工程的受體菌,其突出的優(yōu)點是:___________________________________
(4) 從選擇培養(yǎng)基中挑取所需的單個菌落接種于液體培養(yǎng)基中培養(yǎng),獲得粗提表達產(chǎn)物。將等量毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞接種于細(xì)胞培養(yǎng)板,370C培養(yǎng)。將等量不同濃度的粗提表達產(chǎn)物加進培養(yǎng)孔中,72h后在顯微鏡下觀察細(xì)胞存活情況并,______________實驗結(jié)果如下表所示。
結(jié)果說明__________________________________________
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科目:高中生物 來源:2010-2011學(xué)年河北省高三12月月考生物試卷 題型:綜合題
含有32P或31P的磷酸,兩者化學(xué)性質(zhì)幾乎相同,都可參與DNA分子的組成,但32P比31P質(zhì)量大,F(xiàn)將某哺乳動物的細(xì)胞放在含有31P磷酸的培養(yǎng)基中,連續(xù)培養(yǎng)數(shù)代后得到G0代細(xì)胞。然后將G0代細(xì)胞移至含有32P磷酸的培養(yǎng)基中培養(yǎng),經(jīng)過第1、2次細(xì)胞分裂后分別得到G1、G2代細(xì)胞。再從G0、G1、G2代細(xì)胞中提取出DNA經(jīng)密度梯度離心后得到結(jié)果如圖。由于DNA分子質(zhì)量不同,因此在離心管內(nèi)的分布不同。若①②③分別表示輕、中、重三種DNA分子的位置,請回答:
(1)G0、G1、G2三代DNA離心后的試管分別是圖中的:
G0 、G1 、G2 。
(2)培養(yǎng)基中需加入ATP,說明 。培養(yǎng)基中還需加入
(3)圖中①、②兩條帶中DNA分子所含的元素磷分別是:
條帶① ,條帶② 。
(4)上述實驗結(jié)果證明DNA的復(fù)制方式是 。
(5)DNA能夠準(zhǔn)確復(fù)制原因: 。
(6)用同位素32P、35S分別標(biāo)記噬菌體和大腸桿菌的DNA和蛋白質(zhì),然后進行“噬菌體侵染細(xì)菌實驗”。侵染后產(chǎn)生的子代噬菌體與親代噬菌體形態(tài)完全相同。則子代噬菌體的DNA和蛋白質(zhì)中含有的標(biāo)記元素應(yīng)該是 ( )
A.31P、32P、32S B.31P、32P、35S
C.31P、32P、32S、35S D.33P、32S、35S
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