Question

20．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，在動(dòng)物細(xì)胞工程的其他技術(shù)中都得廣泛應(yīng)用（如圖）．下面是與動(dòng)物細(xì)胞工程相關(guān)的問(wèn)題，請(qǐng)分析回答：

（1）在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，首先要將動(dòng)物組織剪碎，然后用胰蛋白酶（膠原蛋白酶）處理，以分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液．
（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，要保證細(xì)胞必需的營(yíng)養(yǎng)、適宜的溫度　和pH條件，還要提供無(wú)菌、無(wú)毒和適宜的氣體環(huán)境．為達(dá)到無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境條件，除了要對(duì)培養(yǎng)液和培養(yǎng)器具進(jìn)行消毒外，還要①在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素，②定期更換培養(yǎng)液．氣體環(huán)境中CO₂的作用是維持培養(yǎng)液的PH．
（3）應(yīng)用于核移植的供體細(xì)胞一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是10代以后的細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生改變（或保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)）．
（4）如圖表示單克隆抗體的制備過(guò)程，給小鼠注射特定抗原后產(chǎn)生的、與骨髓瘤細(xì)胞融合的細(xì)胞是B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）．在細(xì)胞融合的過(guò)程中，常用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是聚乙二醇（PEG）；篩選出的雜交瘤細(xì)胞所表現(xiàn)出的優(yōu)良性狀是可在體外條件下，無(wú)限增殖，又能分泌單一抗體．

Answer 1

分析 1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)．
2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：①無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)進(jìn)行無(wú)菌處理．通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染．此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害．②營(yíng)養(yǎng)：合成培養(yǎng)基成分：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等．通常需加入血清、血漿等天然成分．③溫度：適宜溫度：哺乳動(dòng)物多是36.5℃+0.5℃；pH：7.2～7.4．④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO₂．O₂是細(xì)胞代謝所必需的，CO₂的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．
3、單克隆抗體的制備過(guò)程是：對(duì)小動(dòng)物注射抗原，從該動(dòng)物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體．

解答 解：（1）在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，動(dòng)物組織需要用胰蛋白酶（膠原蛋白酶）處理分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液．
（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，要保證無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境條件，可采用對(duì)培養(yǎng)液和培養(yǎng)器具進(jìn)行消毒、在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素、定期更換培養(yǎng)液．氣體環(huán)境中CO₂的作用是維持培養(yǎng)液的PH．
（3）10代以后的細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生改變（或保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)），因此在核移植技術(shù)中供體細(xì)胞一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞．
（4）在單克隆抗體的制備過(guò)程中，給小鼠注射特定抗原后，產(chǎn)生的具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞），常用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是聚乙二醇（PEG）誘導(dǎo)具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）與骨髓瘤細(xì)胞融合．篩選出的雜交瘤細(xì)胞具有在體外條件下無(wú)限增殖，又能分泌單一抗體的優(yōu)良性狀．
故答案為：
（1）胰蛋白酶（膠原蛋白酶）
（2）①在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素�、诙ㄆ诟鼡Q培養(yǎng)液、維持培養(yǎng)液的PH
（3）10代以后的細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生改變（或保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)）
（4）B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）　聚乙二醇（PEG）可在體外條件下，無(wú)限增殖，又能分泌單一抗體

點(diǎn)評(píng) 本題考查了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生的識(shí)記能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，準(zhǔn)確判斷問(wèn)題的能力，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．