Question

【題目】回答下列生物科技及其實(shí)踐的相關(guān)問題：

（1）培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉時(shí)為構(gòu)建重組DNA分子通常要用同種限制酶分別切割__________________和__________。將重組DNA轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌時(shí)，可以用________處理農(nóng)桿菌，使重組DNA易于導(dǎo)入。

（2）科學(xué)家利用番茄葉細(xì)胞和馬鈴薯葉細(xì)胞雜交培育“番茄—馬鈴薯”植株的過程中，首先要____________________酶解除去植物細(xì)胞的細(xì)胞壁，以使植物原生質(zhì)體相互分離；在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中，使細(xì)胞分離開來的酶是________。

（3）進(jìn)行早期胚胎的體外培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中除了含有各種有機(jī)鹽類、維生素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分外，還要添加激素和________。

（4）分離細(xì)菌時(shí)通常用固體培養(yǎng)基，原因是__________________________________。與微生物培養(yǎng)基相比，植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長(zhǎng)素和__________，這些植物激素一般需要事先單獨(dú)配制成________保存?zhèn)溆�。使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過________處理后才能丟掉，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。

（5）一定濃度的淀粉溶液經(jīng)過固定化酶柱后，可使淀粉水解成糊精，若用___________測(cè)試，流出物呈________________色表明水解產(chǎn)物糊精生成。

Answer 1

【答案】 含目的基因的DNA片段 Ti質(zhì)粒 CaCl2 纖維素酶和果膠 胰蛋白酶 血清 固體培養(yǎng)基容易形成固定的菌落，便于進(jìn)行篩選 細(xì)胞分裂素 母液 滅菌 淀粉指示劑溶液 紅

【解析】試題分析：基因工程的一般操作步驟有：目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與表達(dá)．其中獲取的目的基因常用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增；基因工程的工具酶有限制酶和DNA連接酶，通常要用同一種限制酶分別切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，然后再用DNA連接酶連接成重組質(zhì)粒。在植物基因工程中，常利用植物的組織培養(yǎng)技術(shù)將植物受體細(xì)胞培養(yǎng)為完整植株，此過程中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例至關(guān)重要。

（1）基因工程中，構(gòu)建基因表達(dá)載體需要用同一種限制酶對(duì)目的基因（含目的基因的DNA片段）和運(yùn)載體（Ti質(zhì)粒）進(jìn)行切割，然后用DNA連接酶進(jìn)行連接。將重組DNA轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌時(shí)，需要對(duì)大腸桿菌用氯化鈣處理，使其成為感受態(tài)，便于導(dǎo)入。

（2）植物體細(xì)胞雜交過程中，先用纖維素酶和果膠酶將植物細(xì)胞壁去掉，獲得原生質(zhì)體；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，將細(xì)胞分散開來。

（3）早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液成分有：無機(jī)鹽、有機(jī)鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分，以及血清等物質(zhì)。

（4）固體培養(yǎng)基容易形成固定的菌落，便于進(jìn)行篩選，所以分離細(xì)菌時(shí)通常用固體培養(yǎng)基；植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素，由于不同的過程兩種激素的比例不同，所以這些植物激素一般需要事先單獨(dú)配制成母液保存?zhèn)溆�。使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟掉，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。

（5）淀粉水解后，用淀粉指示劑溶液測(cè)試，流出物呈紅色表明水解產(chǎn)物糊精生成。