Question

9．某高校研發(fā)的幽門螺桿菌疫苗為基因工程疫苗，對該菌引發(fā)的胃炎、胃潰瘍等疾病具有較好的預(yù)防效果，其有效成分是一種該菌表面抗原蛋白質(zhì)，請回答下列問題．
（1）根據(jù)表面抗原蛋白質(zhì)的氨基酸序列推測出目的基因的脫氧核苷酸序列，進(jìn)行人工合成，然后通過PCR技術(shù)技術(shù)大量擴(kuò)增．
（2）基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)載體，要利用DNA連接酶連接被限制酶切開的鍵．
（3）在表達(dá)過程中，啟動子需與RNA聚合酶識別和結(jié)合，從而驅(qū)動轉(zhuǎn)錄過程．
（4）實(shí)驗(yàn)證明，一定時間內(nèi)間隔口服該疫苗3次效果更好，其主要原因是體內(nèi)產(chǎn)生的記憶細(xì)胞數(shù)量增多，導(dǎo)致獲得的免疫預(yù)防作用更強(qiáng)，持續(xù)時間更久．

Answer 1

分析 1、獲得目的基因的方法：①從基因文庫中獲�。孩诶�用PCR技術(shù)擴(kuò)增：③人工合成：這種方法有兩條途徑，一是以目的基因轉(zhuǎn)錄的信使RNA為模板，反轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)的單鏈DNA，再在酶的作用下合成雙鏈DNA，即目的基因；另一條途徑是蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測出信使RNA序列，再推測出結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列，然后用化學(xué)的方法以單核苷酸為原料合成．
2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建的組成：目的基因+啟動子+終止子+標(biāo)記基因
（1）啟動子：是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)．
（2）終止子：也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的尾端．
（3）標(biāo)記基因的作用：是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來．常用的標(biāo)記基因是抗生素基因．
3、轉(zhuǎn)化的概念：是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程．

解答 解：（1）一種如人工合成法，根據(jù)蛋白質(zhì)的氨基酸序列，推測出信使RNA序列，再推測出結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列，進(jìn)行人工合成目的基因．在用PCR技術(shù)體外大量擴(kuò)增．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟，需要用限制酶將目的基因和運(yùn)載體切割磷酸二酯鍵，再用DNA連接酶連接形成重組DNA．
（3）在表達(dá)過程中，啟動子需與RNA聚合酶識別和結(jié)合，從而驅(qū)動轉(zhuǎn)錄過程．
（4）一定時間內(nèi)間隔口服該疫苗3次，屬于二次免疫反應(yīng)，體內(nèi)產(chǎn)生的記憶細(xì)胞數(shù)量增多，導(dǎo)致獲得的免疫預(yù)防作用更強(qiáng)，持續(xù)時間更久．效果更好．
故答案為：
（1）脫氧核苷酸序列  PCR技術(shù)     
（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體   DNA連接酶
（3）RNA聚合酶              
（4）記憶

點(diǎn)評 本題考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟，掌握獲取目的基因的幾種方法，能根據(jù)題干要求準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)，屬于考綱識記層次的考查．