Question

12．在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)一種廣泛使用的除草劑（含氮有機化合物）在土壤中不易降解，長期使用可導(dǎo)致土壤污染．
（1）為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，可按下面程序選育能降解該除草劑的細菌（已知該除草劑在水中溶解度低，含一定量該除草劑的培養(yǎng)基不透明）．

①要在長期使用該除草劑的土壤中分離目的菌，從物理性質(zhì)、用途方面來看，上述培養(yǎng)皿中培養(yǎng)基的特點是在無氮固體培養(yǎng)基中添加了該除草劑．
②在劃線培養(yǎng)時，只有很少菌落出現(xiàn)，大部分細菌在此培養(yǎng)基上不能生長的主要原因是培養(yǎng)液中缺少這些細菌可利用的氮源或有氧條件抑制了這些細菌的生長．
③在固體培養(yǎng)基上形成的菌落中，無透明帶菌落利用的氮源主要是氮氣，有透明帶菌落利用的氮源主要是該除草劑，據(jù)此可篩選出目的菌．
（2）為了生產(chǎn)用于治理該除草劑污染的微生物制劑，科研工作者研究了目的菌群體生長的規(guī)律，繪制出該細菌的生長速率曲線（如圖2）．下列有關(guān)說法正確的是A．
A．上述目的菌是在恒定容積的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)的
B．?dāng)U大培養(yǎng)最好選擇b時期的細菌接種，但此期最后階段細菌數(shù)量已減少
C．c時期的細菌不再進行繁殖，有芽孢生成
D．d時期生活的細菌已經(jīng)不能再合成初級代謝產(chǎn)物．

Answer 1

分析 1、從土壤中篩選分離目的微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．篩選能降解該除草劑的細菌需要以該除草劑為唯一的氮源的選擇培養(yǎng)基．
2、圖示是篩選分離能降解該除草劑的細菌的過程，所用的接種方法是平板劃線法．
3、圖2中，a表示調(diào)整期，b表示對數(shù)期，c表示穩(wěn)定期，d表示衰亡期．

解答 解：（1）①目的菌的特點是能夠降解除草劑（含氮有機化合物），培養(yǎng)基的營養(yǎng)要求為用不含氮選擇培養(yǎng)基，同時由圖中可知分離菌種選用的是固體平板劃線法，故從物理性質(zhì)和用途方面來看，培養(yǎng)基的特點為加入除草劑，不加其他氮源的固體培養(yǎng)基．
②因不含有其他氮源，大多數(shù)細菌不能正常在此培養(yǎng)基上生長．
③除草劑被分解有透明帶，有透明帶的菌落利用該除草劑為氮源，無透明帶但能夠在無氮培養(yǎng)基上生長的菌落，并不能夠分解除草劑，但可利用氮氣為氮源，由此篩選目的菌．
（2）A、根據(jù)圖中曲線微生物的生長速率的變化規(guī)律可知，該細菌先增長后穩(wěn)定再降低，說明目的菌是在恒定容積的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)的，A正確；
B、b為對數(shù)期，b時期菌體數(shù)量呈指數(shù)增長，c為穩(wěn)定期，B錯誤；
C、c時期的細菌仍然能夠增殖，只是出生率等于死亡率，C錯誤；
D、初級代謝產(chǎn)物在各時期都能夠生成，D錯誤故選：A．
故答案為：
（1）①在無氮固體培養(yǎng)基中添加了該除草劑　②培養(yǎng)液中缺少這些細菌可利用的氮源�、鄣獨狻≡摮�草劑
（2）A

點評 本題主要考查微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識，意在強化微生物培養(yǎng)的所以操作過程，提高學(xué)生實驗技能．