回答下列有關(guān)生物工程的問題.
如圖為某種質(zhì)粒表達(dá)載體簡圖,小箭頭所指分別為限制性內(nèi)切酶EcoRI、BamHI的酶切位點(diǎn),amp
R為青霉素抗性基因,tct
R為四環(huán)素抗性基因,P為啟動(dòng)子,T為終止子,ori為復(fù)制原點(diǎn).已知目的基因的兩端分別有包括EcoRI、BamHI在內(nèi)的多種酶的酶切位點(diǎn).據(jù)如圖回答下列問題:
(1)若要構(gòu)建重組質(zhì)粒,需要對(duì)目的基因進(jìn)行測序,并將測序結(jié)果與
酶的識(shí)別序列進(jìn)行對(duì)比,以確定選用何種酶.該類酶作用的部位是
鍵.
(2)若用EcoRI酶對(duì)目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行酶切,再用DNA連接酶處理,則由兩個(gè)DNA片段連接形成的產(chǎn)物有
種.用上述幾種連接產(chǎn)物與無任何抗藥性的原核宿主細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn).之后將這些宿主細(xì)胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中,能生長的原核宿主細(xì)胞所含有的連接產(chǎn)物是
.
(3)為了防止目的基因和質(zhì)粒表達(dá)載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接,酶切時(shí)應(yīng)選用的酶是
.
(4)酶與底物能特異性結(jié)合.以下研究利用了生物分子間的特異性結(jié)合的有
(可多選)
A.分離得到核糖體,用蛋白酶酶解后提rRNA
B.用無水乙醇處理菠菜葉片,提取葉綠體基粒膜上的光合色素
C.通過分子雜交手段,用熒光物質(zhì)標(biāo)記的目的基因進(jìn)行染色體定位
D.將抑制成熟基因?qū)敕眩鋗RNA與催化成熟酶基因的mRNA互補(bǔ)結(jié)合,終止后者翻譯,延遲果實(shí)成熟.
(5)從變異的角度看,基因工程的原理是
;而植物細(xì)胞雜交的原理是
.