Question

14．據(jù)報道，三分之一的缺血性心臟疾病是由于高膽固醇造成的．研究發(fā)現(xiàn)某種乳酸菌能降低膽固醇，科研人員利用微生物分離培養(yǎng)技術(shù)來獲得能高效降低膽固醇的乳酸菌．回答下列問題：
（1）乳酸菌是一種原核生物，其發(fā)酵過程會以膽固醇作為碳源．取適量發(fā)酵的酸肉，剪碎、研磨然后加入無菌水稀釋，目的是獲得菌種．
（2）對乳酸菌的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行的滅菌方法是．剛剛制作好的平板培養(yǎng)基需冷卻后并倒立放置，目的是避免冷凝水進(jìn)入培養(yǎng)基造成污染．
（3）將選擇的菌株接種到高膽固醇培養(yǎng)液中，一段時間后離心，測定上清液（填“上清液”或“下清液”）中的膽固醇含量，并通過與高膽固醇培養(yǎng)液比較，測定菌株降低膽固醇的能力．對利用膽固醇的乳酸菌菌種長期保存的方法是甘油管藏法．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中主要成分包括：水、無機(jī)鹽、碳源、氮源．
2、培養(yǎng)基配制時的注意事項
①全程要求無菌操作，無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還能有效地避免操作者自身被微生物感染．
②培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時，才能用來倒平板．可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，當(dāng)感覺到錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時，就可以進(jìn)行倒平板．操作時應(yīng)使錐形瓶的瓶口通過火焰，以防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基．
③平板冷凝后皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，若將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染．
④在倒平板的過程中，不能將培養(yǎng)基濺到皿蓋與皿底之間的部位，因為空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生．

解答 解：（1）膽固醇在培養(yǎng)基中屬于碳源．發(fā)酵的酸肉中含有乳酸菌，將發(fā)酵的酸肉剪碎、研磨然后加入無菌水稀釋，目的是獲得菌種．
（2）對培養(yǎng)基進(jìn)行的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法．剛剛制作好的平板培養(yǎng)基需冷卻后并倒立放置，目的是避免冷凝水進(jìn)入培養(yǎng)基造成污染．
（3）膽固醇屬于脂質(zhì)，密度較小，存在于上清液中，所以純化后的乳酸菌菌株接種到高膽固醇培養(yǎng)液中培養(yǎng)，一段時間后離心測定上清液中膽固醇的含量，以未接種的高膽固醇培養(yǎng)液作為對照，測定菌株降膽固醇的能力，篩選出目的菌株．對利用膽固醇的乳酸菌菌種長期保存的方法是甘油管藏法．
故答案為：
（1）碳源  獲得菌種
（2）高壓蒸汽滅菌   避免冷凝水進(jìn)入培養(yǎng)基造成污染
（3）上清液   高膽固醇培養(yǎng)液    甘油管藏法

點評 本題主要考查微生物的分離接種方法與微生物的培養(yǎng)基鑒定等知識，意在強(qiáng)化學(xué)生對相關(guān)知識的識記、理解與運(yùn)用．