Question

【題目】某科研小組重復(fù)教材“觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布”的實驗時發(fā)現(xiàn)實驗存在兩大困難：實驗效果不理想，難以出現(xiàn)預(yù)期顏色；實驗操作步驟繁瑣復(fù)雜。于是他們多次對該實驗做了探索與研究，做出了相關(guān)改進(jìn)（改進(jìn)實驗結(jié)果穩(wěn)定，效果良好）

Ⅰ．實驗方案：（1）材料用具：人口腔上皮細(xì)胞、載玻片、蓋玻片、吸水紙、生理鹽水、顯微鏡。

（2）染色液的配制：略（與教材相同）

（3）實驗步驟：

①在潔凈的載玻片上，滴一滴生理鹽水；

②用消毒牙簽在自己漱凈的口腔內(nèi)側(cè)壁上輕輕的刮幾下，把牙簽上附有碎屑的一端，放在上述載玻片上的生理鹽水液中涂抹幾下；

③點燃酒精燈，將涂有口腔上皮細(xì)胞的載玻片烘干；

④用微量可調(diào)移液器吸取 染液，滴加在口腔上皮細(xì)胞上，染色3-5分鐘；

⑤小心蓋上蓋玻片，蒸餾水脫色1-2次，用吸水紙吸去多余的水分和染液；

⑥將制作完成的載玻片放置到顯微鏡下觀察。先用低倍鏡觀察選擇染色均勻、色澤 的區(qū)域，移至視野中央，將物像調(diào)節(jié)清晰；換用高倍鏡后，調(diào)節(jié) ，直至清楚的觀察到細(xì)胞核與細(xì)胞

質(zhì)染色情況。

Ⅱ．補(bǔ)充實驗過程、完善結(jié)果

（1）實驗第④步的染液是指___________________。

（2）實驗第⑥步中選擇染色均勻色澤________（“深”，“淺”），換用高倍鏡后，調(diào)節(jié)________________。

（3）在顯微鏡下會看到人口腔上皮細(xì)胞中的_______________被染成綠色，_____被染成紅色，原理是________________________。

（4）依據(jù)細(xì)胞中顏色分布的不同，可得出的實驗結(jié)論是___________________。

Ⅲ．將口腔上皮細(xì)胞換為洋蔥鱗片葉內(nèi)表皮細(xì)胞，重復(fù)上述試驗，實驗設(shè)計如下：（表示進(jìn)行此項操作，空白處代表不進(jìn)行此項操作）

實驗操作	第1組	第2組	第3組
在潔凈載玻片上滴加1滴8%HCl
在潔凈載玻片上滴加1滴清水
將一小塊洋蔥鱗片葉表皮置于液滴浸泡5分鐘
反復(fù)用蒸餾水清洗材料3次
反復(fù)用1%NaHCO3溶液清洗材料3次
用吸水紙將載玻片上液滴吸干
滴加染液染色5分鐘，在顯微鏡下觀察染色效果

（5）結(jié)果表明3組實驗均能把細(xì)胞核染色，且染色深淺程度依次為___________，這一結(jié)果表明8%HCl能夠增加活的洋蔥鱗片葉表皮細(xì)胞的細(xì)胞膜通透性，但細(xì)胞中殘留的HCl會影響染色劑的染色效果，且后者影響更大。

綜上所述，實驗中是否要用HCl處理應(yīng)依據(jù)所選材料而定。若使用HCl處理，一定要注意處理時間不宜過長以免HCl進(jìn)入細(xì)胞核破壞DNA結(jié)構(gòu)，并及時用1%NaHCO3溶液中和殘留的HCl，從而避免細(xì)胞內(nèi)殘留HCl改變?nèi)旧珓┌l(fā)揮作用的pH值。

Answer 1

【答案】甲基綠吡羅紅混合染液 淺 細(xì)準(zhǔn)焦螺旋 細(xì)胞核 細(xì)胞質(zhì) ，甲基綠吡羅紅對DNA和RNA的親和力不同，甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色、吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色 真核細(xì)胞的DNA主要分布在細(xì)胞核，RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì) 第2組＞第3組＞第1組

【解析】

1、實驗原理

①DNA主要分布于細(xì)胞核中，RNA主要分布于細(xì)胞質(zhì)中；

②甲基綠和吡羅紅對DNA、RNA的親和力不同：利用甲基綠、吡羅紅混合染色劑將細(xì)胞染色，可以顯示DNA和RNA在細(xì)胞中的分布；

③鹽酸（HCl）能夠改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞，同時使染色體中的DNA與蛋白質(zhì)分離，有利于DNA與染色劑結(jié)合。

2、實驗步驟：取口腔上皮細(xì)胞，水解，沖洗涂片，染色，觀察。

3、結(jié)果和結(jié)論：DNA主要分布于細(xì)胞核中，RNA主要分布于細(xì)胞質(zhì)中。

Ⅱ（1）觀察DNA和RNA的分布用甲基綠吡羅紅混合染液進(jìn)行染色。

（2）先用低倍鏡觀察選擇染色均勻、色澤淺的區(qū)域，移至視野中央，將物像調(diào)節(jié)清晰；換用高倍鏡后，調(diào)節(jié)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋。

（3）由于甲基綠吡羅紅對DNA和RNA的親和力不同，甲基綠使DNA呈現(xiàn)綠色、吡羅紅使RNA呈現(xiàn)紅色，DNA主要分布在細(xì)胞核中，RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中，所以細(xì)胞核被染成綠色，而細(xì)胞質(zhì)被染成紅色。

（4）該實驗說明了真核細(xì)胞的DNA主要分布在細(xì)胞核，RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)

Ⅲ（5）根據(jù)結(jié)論“8%HCl能夠增加活的洋蔥鱗片葉表皮細(xì)胞的細(xì)胞膜通透性，但細(xì)胞中殘留的HCl會影響染色劑的染色效果，且后者影響更大”，而NaHCO3可以中和鹽酸，因此染色效果最好的是第2組，由于8%HCl影響更大，所以第1組顏色最淺，因此順序是第2組＞第3組＞第1組。