Question

【題目】酒是以水、高粱、小麥為原料，通過固態(tài)發(fā)酵而成。環(huán)境中存在的獨特微生物是釀制酒獨特品質的關鍵因素之一。為了提取環(huán)境中的獨特菌種，某高中學校生物研究性學習小組以優(yōu)質的高粱和小麥為原料，制作培養(yǎng)基，搜集、分離空氣中的微生物。請回答下列問題：

（1）該培養(yǎng)基在接種微生物前，必須先進行_____滅菌。

（2）將上述培養(yǎng)基暴露在空氣中培養(yǎng)一段時間后，取10g該培養(yǎng)基用無菌水制成100mL樣品溶液。再將樣品溶液稀釋104倍后，各取樣品溶液0.1mL，在5個培養(yǎng)基平板上接種。培養(yǎng)一段時間后，平板上長出的微生物菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。該過程采取的接種方法是_____。每克培養(yǎng)基樣品中的微生物數(shù)量是_____個。

（3）與用血細胞計數(shù)板記數(shù)相比，該計數(shù)方法測得的微生物數(shù)目要低。其原因是_____________ 。

（4）釀酒的主要微生物將葡萄糖分解為酒精的酶存在于_____。其生產酒的總反應式可表示為_____。

（5）為了研究發(fā)酵罐中釀酒微生物的生長情況，常要取樣統(tǒng)計分析，并測定pH。若某同學未將取樣的樣品貼上標簽，那么，怎樣確定取樣樣品的先后順序_____。主要依據(jù)是_____。

Answer 1

【答案】高壓蒸汽 稀釋涂布平板法 1.75×108 死亡的微生物不能形成菌落；兩個或多個菌體連在一起時形成一個菌落 細胞質基質 根據(jù)發(fā)酵液的pH大小排序 微生物發(fā)酵過程中發(fā)酵液的pH值逐漸變小

【解析】

微生物常見的接種的方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。每毫升樣品中的細菌數(shù)=（平板的平均菌落數(shù)÷涂布的體積）×稀釋的倍數(shù)。參與釀酒的微生物是酵母菌，代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型，在有氧條件下，酵母菌大量繁殖，反應式為，無氧條件下進行酒精發(fā)酵，反應式為。

（1）培養(yǎng)基滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌法。

（2）根據(jù)題干可知，菌落計數(shù)采用的方法為稀釋涂布平板法，統(tǒng)計的菌落數(shù)應介于30~300之間，故選菌落數(shù)為156、178和191的平板計數(shù)。每克培養(yǎng)基樣品中的微生物數(shù)量對應的應該是每毫升樣品溶液中的微生物數(shù)量，因此每克培養(yǎng)基樣品中的微生物數(shù)量為（156+178+191）÷3÷0.1×105=1.75×108個。

（3）由于死亡的微生物不能形成菌落，以及兩個或多個菌體連在一起時形成一個菌落，往往統(tǒng)計的是一個菌落，所以用稀釋涂布平板法測得的微生物數(shù)目要低。

（4）釀酒的主要微生物是酵母菌，酵母菌通過無氧呼吸將葡萄糖分解為酒精，無氧呼吸的場所是細胞質基質，總反應式為。

（5）發(fā)酵過程會產生CO2使培養(yǎng)液pH逐漸降低，因此根據(jù)發(fā)酵液的pH大小確定取樣樣品的先后順序。