Question

【題目】酵母菌生長的最適宜溫度在20～30℃之間，能在pH為3～7.5的范圍內(nèi)生長，在氧氣充足的環(huán)境中主要以出芽生殖的方式快速增殖。大約每1.5～2小時增殖一代。某研究性學(xué)習小組據(jù)此探究酵母菌種群在不同的培養(yǎng)液濃度和溫度條件下種群密度的動態(tài)變化，進行了如下實驗，實驗操作步驟如下：

第一步：配制無菌馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)液和活化酵母菌液。

第二步：利用相同多套裝置，在適宜條件下培養(yǎng)。

第三步：用血球計數(shù)板計數(shù)裝置中起始酵母菌數(shù)目，做好記錄。

第四步：將各裝置放在其他條件相同且適宜的條件下培養(yǎng)。

第五步：連續(xù)7天，每天隨機抽時間取樣計數(shù)，做好記錄。

回答下列問題：

（1）改正實驗操作步驟中的一處錯誤：_____________________________________。

（2）某同學(xué)第5天在使用血球計數(shù)板計數(shù)時做法如下：

①搖勻試管，取1mL培養(yǎng)液并稀釋10倍（稀釋樣液的無菌水中加入了幾滴臺盼藍染液）。

②先將__________放在計數(shù)室上，用吸管吸取稀釋后的培養(yǎng)液滴于其邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液用濾紙吸去，制作好臨時裝片。

③顯微鏡下觀察計數(shù)：在觀察計數(shù)時只記______（填“被”或“不被”）染成藍色的酵母菌。

（3）若在顯微鏡下觀察計數(shù)某一小方格時，活菌分布如下圖所示，則記錄的數(shù)目是___________個。若平均每個樣方中的酵母菌數(shù)目就是該數(shù)目，所使用的血球計數(shù)板有16個中方格，每1中方格中有25個小方格，每1個大方格容積為0.1mm3（1mL=1 000mm3）。則酵母菌細胞個數(shù)/mL=___________________。

（4）在實驗過程中，培養(yǎng)液的pH值變化為______________。

（5）實驗結(jié)束后，用試管刷蘸洗滌劑擦洗血球計數(shù)板的做法是錯誤的，正確的方法是________________________。

Answer 1

【答案】第五步中應(yīng)每天同一時間取樣 蓋玻片 不被 8 3.2×108 逐漸變小 浸泡和沖洗

【解析】

1、探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的動態(tài)變化實驗的原理：

（1）在含糖的液體培養(yǎng)基（培養(yǎng)液）中酵母菌繁殖很快，迅速形成一個封閉容器內(nèi)的酵母菌種群，通過細胞計數(shù)可以測定封閉容器內(nèi)的酵母菌種群隨時間而發(fā)生的數(shù)量變化。

（2）養(yǎng)分、空間、溫度和有毒排泄物等是影響種群數(shù)量持續(xù)增長的限制因素，細菌在一定體積培養(yǎng)液中的增長如圖所示：

。

2、通過建立反映種群動態(tài)變化的數(shù)學(xué)模型，分別說明種群個體數(shù)量的增長規(guī)律以及種群外部環(huán)境因素和種群內(nèi)部因素對種群個體數(shù)量的制約．
血球計數(shù)板有16個中方格，每l中方格中有25個小方格，即總共有16×25=400個小方格。計數(shù)室的容積為0.1mm3（1mL=1000mm3），每個小方格的體積為mm3，；酵母細胞個數(shù)/1mL=平均每個小方格的酵母菌數(shù)÷每1個小方格容積×稀釋倍數(shù)=平均每個小方格的酵母菌數(shù)×400×104×稀釋倍數(shù)。

（1）第五步中“每天隨機抽時間取樣計數(shù)”應(yīng)改為“每天同一時間（定時）取樣”，這樣每天取樣時間間隔相同，是所得的實驗數(shù)據(jù)更加準確，畫出的變化曲線更加具有參考價值。

（2）②在對酵母菌數(shù)量進行抽樣檢測時，首先振蕩搖勻試管，取1mL培養(yǎng)液并適當稀釋，然后將蓋玻片放在計數(shù)室上，用吸管吸取稀釋后的培養(yǎng)液滴于其邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液用濾紙（吸水紙）吸去，制作好臨時裝片。

③在顯微鏡下觀察計數(shù)時，由于死的酵母菌細胞膜失去選擇透過性，所以被染成藍色，而活的酵母菌不會被染色，因此計數(shù)時只記不被染成藍色的酵母菌。

（3）已知所使用的血球計數(shù)板有16個中方格，每l中方格中有25個小方格，每1個小方格容積為0.1mm3（1mL=1000mm3）。據(jù)圖分析可知每個小方格平均有8個酵母菌，則1mL培養(yǎng)液中酵母細胞個數(shù)=平均每個小方格的酵母菌數(shù)÷每1個小方格容積×稀釋倍數(shù)=平均每個小方格的酵母菌數(shù)×400×104×稀釋倍數(shù)=8×400×104×10=3.2×108。

（4）在實驗過程中，由于酵母菌呼吸產(chǎn)生二氧化碳，所以培養(yǎng)液的pH值會逐漸變小。

（5）實驗結(jié)束后，血球計數(shù)板應(yīng)該進行浸泡和沖洗，而不能用試管刷蘸洗滌劑擦洗。